zj基因工程第5章(目的基因的合成完全版)PPT.pptVIP

第五章 目的基因的获得;基因工程主要是通过人工的方法分离、改造、扩增并表达生物的特定基因，从而深入开展核酸遗传研究或者获取有价值的基因产物。通常将那些已被或者准备要被分离、改造、扩增或表达的特定基因或DNA片段，称为目的基因。因目的基因片段需插入载体，导入宿主细胞内复制，所以对宿主细胞DNA而言，又称它为外源性基因。 ;目的基因用途 ;④应用某种基因大量表达，生产所需要的蛋白质或多肽（如胰岛素、干扰素等药物）。 ⑤在农、林、牧、副、渔业中，改造某些目的基因，以改良品种，促进经济发展。 ⑥建立基因治疗院，选用某种正常基因，引入患者体内，对某些先天性遗传疾病进行治疗。;挑出所要群落; 几种生物的基因组比较;;;目的基因的获取;第一节 基因组文库的构建;1.1 基因组文库构建的基本步骤 ;组织或细胞染色体DNA;限制性内切酶;;1.2 基因组DNA的切割（制备）;1.3 载体和受体的选择;1.4 重组DNA分子的构建;1.5 重组DNA分子导入受体细胞;1.6 基因文库的完备性;1.7 基因文库的质量标准;1.8 基因文库的扩增、分装及保存;第二节 cDNA基因文库构建;2.1 cDNA基因文库构建的步骤;mRNA ;尿素-氯化锂法 硫氰酸胍法 polyT亲和层析法 密度梯度离心分级法 探针筛选法;2.1.2 从mRNA制备cDNA;cDNA第一链的合成;cD