干细胞和组织工程成像技术PPT.pptxVIP

干细胞及组织工程成像技术之生物发光成像技术 陈煜烨 徐希 潘军 章佩琳 方鑫如 2015.12.22 生物成像技术 可见光及荧光成像 ——生物发光（bioluminescence）与荧光（fluorescence） 正电子衍射成像（Positron Emission tomography ，PRT） ——放射性标记葡萄糖导入体内，被分裂旺盛组织吸收，常用于检测肿瘤的良恶性 ······ 单光子衍射（Single photon diffraction） 超声 ——物理学方法 核磁共振（nuclear magnetic resonance） 生物发光成像技术 bioluminescence imaging (BLI) 1.成像的原理和基本内容 2.实验操作的过程 3.应用领域和实例 5.评价及展望 成像的原理和基本内容 荧光酶 酶在ATP及氧气的存在条件下，催化荧光素的氧化反应才可以发光，因此只有在活细胞内才会产生发光现象，并且光的强度与标记细胞的数目线性相关。 怎么能让没有荧光酶基因和荧光素的细胞发光？ 成像的原理和基本内容 有关荧光酶基因的基因工程 成像的原理和基本内容 实验仪器观察 每次荧光素酶催化反应只产生一个光子，这是肉眼无法观察到的，精诺真公司(Xenogen Corp.)生产的IVIS成像系统，应用一个高度灵敏的制冷CCD相机及特别设计的成像暗箱和成像软件，可观测并记录到这些光子。 实验操作总的流程 得到含有荧光酶基因的 细胞株 注入荧光物质，培养 观察监测 癌症与抗癌药物研究 免疫学与干细胞研究 评估组织工程的是否成功 ······ 肿瘤细胞株、荧光素酶标记的造血干细胞、荧光素酶基因标记的HSV-1病毒······ 应用领域及实例 1.生物发光检测体内药物治疗的复发作用 应用领域及实例 2.构造肺癌模型 应用领域及实例 3.评价组织工程成败与否 通过EGFP标记的组织工程细胞移植到小鼠体内特制的支架上，观察该细胞的生长和变化，从而判断组织工程的成败与否。 评价及展望 优点 缺点 特异性强，无自发荧光 信号较弱 灵敏度高，在体内可检测到几百个细胞 检测时间较长，需要灵敏的镜头，仪器精密度要求高 检测深度在3-4个厘米 需要注入荧光素，实验成本高 精确定量 有些物质不能用生物发光标记，如抗体、多肽等 可做到连续监测 很难用于人体 生物发光成像技术的优缺点 谢谢 第二小组