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1例冷凝集造成ABO血型鉴定及配血困难处理 　　[关键词] 冷凝集；ABO血型；配血困难 　　[中图分类号] R457.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-7210（2012）01（a）-118-02 　　 　　由于高效价的冷反应自身抗体可以干扰ABO血型鉴定与交叉匹配试验。本文发现1例冷凝集致ABO血型中B型错定为AB型，导致交叉配血试验，主、次管均凝集，延迟输血。笔者应用自身抗体吸收试验去除自身抗体，提供适合的血清用于ABO血型反定型、血液交叉匹配试验与同种抗体检测。现结合实例报道如下： 　　1 临床资料 　　1.1 一般资料 　　患者，男，46岁，因“畏寒、发热、黄疸4个月，加重1 d”入院。入院查体：T 37.3℃，P 130次/min，R 36次/min，BP 156/98 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa），意识模糊，皮肤、巩膜深度黄染，重度贫血貌，无肝掌、蜘蛛痣，未见皮疹及出血点，无瘀斑，呼吸急促，双肺呼吸音粗，两肺底可闻及少许湿性啰音，腹平软，无压痛、反跳痛，肝肋下2 cm，质软，脾触诊不满意，墨菲征阳性，移动性浊音（-），双下肢无水肿。入院诊断：1.黄疸待查（胆囊炎、溶血性黄疸）；2.肝性脑病（病危）。住院时查血常规：RBC 1.92×1012/L，WBC 32.86×109/L，HGB 24 g/L，HCT 9.64%，PLT 25.20×109/L。肝功能：TBIL 550.1 μmol/L，DBIL 500.9 μmol/L，IBIL 49.2 μmol/L，ALT 108.3 IU/L，AST 175.1 IU/L，GGT 118 U/L，ALP 134 U/L，LDH 1 180 U/L，TP 58.6 g/L，ALB 35.9 g/L。血生化：K+ 6.67 mmol/L，Na+ 138.65 mmol/L，Cl-102.08 mmol/L，Ca2+ 2.09 mmol/L，UREA 35.41 mmol/L，CREA 179.3 mmol/L。血清乙型肝炎标志物检测“二对半”均为阴性。2011年1月9日中午内科住院医生申请红细胞悬液2 U。 　　1.2 试剂 　　抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体）、ABO反定型试剂（单克隆抗体）、RhD试剂均由长春博德生物技术有限公司提供。凝聚胺介质试剂由珠海贝索生物技术有限公司提供。 　　1.3 方法 　　对于病房送检交叉标本，检验科血库首查血型为AB型RhD阳性，当时采用生理盐水法和凝集胺法与同型AB型RhD阳性红细胞悬液交叉配血，结果主管、次管均凝集，未发血。下午接班后，笔者采用试管法重新对患者血样做正反定型鉴定，结果正定型是AB型、反定型为O型，RhD阳性，正反定型不符。ABO血型正反定型不符的主要原因为冷自身抗体和ABO亚型，占不符总数的53.4%[1]。笔者观察到EDTA-K2抗凝真空管内患者血样有颗粒状凝集，再结合血常规结果异常[2]，怀疑患者血液可能存在高度冷凝集，要求病房重新抽加抗凝剂和无抗凝剂各一管5 ml血样复查。 　　对新送检的血样进行冷反应自身抗体吸收处理。操作步骤：①取1份患者抗凝血标本置于37℃下孵育，防止冷抗体吸收到红细胞上；另一份患者不抗凝血标本置入4℃冰箱中，让红细胞充分吸收冷自身抗体后，立即分离血清。②应用37℃生理盐水洗涤已孵育10 min以上的患者抗凝血标本中的红细胞，重复洗涤3次，洗涤后红细胞分别置入3支试管内用笔标记1、2、3号试管，每支试管约有1 ml红细胞。③将2 ml患者血清加入第1支试管中与红细胞混匀，置入4℃冰箱中30～60 min，每隔10 min摇动1次，使其充分吸收。④将试管置入离心机，1 000×g离心5 min。⑤吸取出的血清再与第2支试管混匀，重复上述步骤。⑥取末次完全吸附后冷反应自身抗体血清待用。 　　血型鉴定及交叉配血：应用37℃生理盐水洗涤已孵育10 min以上抗凝血标本中的红细胞，重复洗涤3次再配成3%～5%的红细胞悬液，于处理末次吸附后血清再做ABO血型鉴定，结果正反定型相符为B型RhD阳性。交叉配血及处理：用上述处理后的患者血清及3%～5%红细胞悬液，与B型RhD阳性同型红细胞悬液按常规操作[3]，做盐水介质法和凝集胺法交叉配血试验，结果两法主、次管均无凝集，无溶血现象，通知病房取血。 　　1.4 抗体筛查实验 　　1.4.1 直接球蛋白试验（direct antiglobulin test，DAT） 多特异性抗球蛋白试剂（IgG，C3d）由上海血液生物医药有限责任公司提供。阳性对照IgG型抗D致敏的5%RhD阳性红细胞生理盐水悬液。取3人份O型红细胞等量混匀，经生理盐水洗涤后取压积红细胞，加等量抗D血清，置于37℃水浴中致