丙型肝炎病毒核心抗原检测对缩短抗体检测窗口期作用研究.docVIP

丙型肝炎病毒核心抗原检测对缩短抗体检测窗口期作用研究 　　【摘要】 目的 探讨HCV Core Ag缩短Ab检测窗口期的作用。方法 通过询问病史筛选存在丙肝危险因素人群35例，通过cAg、Ab检测结果研究缩短窗口期情况。结果 HCV cAg早期辅助临床诊断丙肝比Ab检测（2011年前）方法缩短约36.5天，Ab检测（2011年后）方法缩短约33.7天。结论 HCV Core Ag实验可有效缩短窗口期，为临床提供可信结果。 　　【关键词】 丙型肝炎病毒；核心抗原；抗体；窗口期 　　卫生部发布《丙型病毒性肝炎（丙肝）防治知识要点》［1］提示丙肝起病隐匿，容易被忽视，易慢性化迁延不愈导致慢性肝脏炎症坏死直至纤维化，更有部分重症感染患者病情恶化逐渐发展最终导致肝硬化，预后不良。现临床丙肝初步筛选结果一般为抗体检测结果，但存在窗口期导致临床高漏诊率，且丙肝后期治疗主要使用干扰素和利巴韦林疗程长，费用昂贵。丙肝核心抗原检测是近10多年发展的方法，原理上能有效缩短窗口期，本文主要验证其缩短窗口期的作用。1 对象与方法 　　1.1 研究对象 在2007.9-2010.9时间段内与滨州医学院附属医院传染科等医师合作，在病人知情同意和伦理学委员会同意情况下通过询问病史，筛选有丙肝病毒危险因素人群，包括与丙肝阳性患者危险接触如针刺或在非正规场所有创伤性操作等人群，在病人初次就诊时抽一次血，7天后再次就诊时抽一次血，筛选HCV cAg初次检测阴性，按要求按时检测后阳性病人，隔7天检测至HCV Ab阳性终止。排除最终检测阴性或者中途丢失、未按时间要求检测或初次检测阳性病人。所有血清标本剩余部分均放入-70℃冻存以备复查。 　　1.2 方法与试剂 　　1.2.1 游离HCV Core Ag定性 强生Ortho trak-CTM丙肝病毒（HCV）游离核心抗原诊断（ELISA）检测试剂盒，操作严格按照试剂盒说明。 　　1.2.2 HCV Ab定性 珠海丽珠酶联免疫法（第三代）试剂盒（2011年前），操作严格按照试剂盒说明。 　　1.2.3 HCV Ab定性 珠海丽珠酶联免疫法（第三代）试剂盒（2011年后），根据《2010版中国药典》要求检测过程中加入样本后反应时间应不低于60分钟，加入酶结合物后反应时间应不低于30分钟，加入显色液后反应时间应不低于30分钟，操作???格按照试剂盒说明。使用保存标本复溶后检测。 　　1.2.4 HCV RNA定量 深圳匹基生物工程有限公司HCV核酸扩增荧光定量检测试剂盒和Rotor-Gene3000荧光定量扩增仪，操作见试剂盒说明。2 结 果 　　2.1 共筛选35例确诊为丙肝病人 人群基本情况，见表1。一般年轻人居多，分析可能是年轻人比较冲动，容易在路边非正规场所进行有创性操作，比如穿耳孔、美容、纹身等操作。 　　 　　表1 人群情况 　　 　　特征 有丙肝危险因素35例 　　年龄（岁） 35±11.54（18-60） 　　性别（男性/女性） 12/23 　　体重（Kg） 53.8±10.57（40-75.5） 　　其它肝炎史 无 　　2.2 抗原检测缩短“窗口期”情况 以HCV RNA和HCV cAg同时阳性或HCV RNA和HCV cAg某一项为阳性的时间为确定为起始时间。表2显示每次检测新发现的阳性例数。图1以直观的方式显示从第一次开始检测后丙肝确诊阳性的总例数，共检测7天*7次后全部检测出。 　　 　　表2 采用以下方法检测结果每次新发现阳性的例数 　　 　　时间（天） HCV RN 　　A检测 HCV核心 　　抗原测定 Anti-HCV 　　检测(改变前) Anti-HCV 　　检测（改变后） 　　起始 35 33 0 0 　　7 0 2 0 0 　　14 0 0 0 0 　　21 0 0 2 3 　　28 0 0 4 6 　　35 0 0 11 16 　　42 0 0 14 8 　　49 0 0 4 2 　　图1 每次检测后确诊的丙肝例数 　　3 讨 论 　　目前，丙肝病毒RNA聚合酶缺乏错误校对机制导致基因组变异非常频繁无有效疫苗［2］，且抗体检测存在“窗口期”［3］。临床诊断丙肝主要依赖于实验室结果，而丙肝早期治疗是可以治愈的，目前主要使用聚乙二醇干扰素+利巴韦林等治疗方式，早期治疗可以减少疗程节约费用，2011年欧美药品监管部门陆续批准特拉泼维（Telaprevir）和博赛泼维（Boceprevi）两个蛋白酶抑制剂销售，但在国内还未引进，早诊断仍是丙肝治疗的关键，游离核心抗原原理可有效早期辅助诊断HCV。 　　我们研究35例确诊丙肝的病例，在不同时间段比较游离HCV Core Ag和Anti-HCV结果，通过计算发现HCV cAg实验比Ab检测（方法改变前）缩短窗口期约36.5天，方法改变后缩短约3