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高三复习课基因工程PPT
;基因工程需要哪些工具酶呢？;考点 一 基因工程的工具?
1.工具酶与其他酶的比较
(1)五种DNA相关酶的比较: ; 项目
种类 ;(2)限制酶与DNA连接酶的关系(如图):
①限制酶不切割自身DNA的原因:原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
②DNA连接酶起作用时不需要模板。; 基因工程的基本操作程序;目的基因的获取;PCR技术—聚合酶链式反应 ;利用PCR技术扩增目的基因;PCR技术扩增过程;目的基因的mRNA;基因表达载体的构建;1、导入植物细胞;显微注射法：将基因表达载体提纯，用显微仪注射到受
精卵中;3、导入微生物细胞;——检查是否成功;【高考警示】
(1)目的基因的插入位点不是随意的:
基因表达需要启动子与终止子的调控,所以目的基因应插入到启动子与终止子之间的部位。
(2)两次使用的限制酶通常为同一种酶,这样形成的黏性末端碱基之间互补,便于连接。
(3)基因工程操作过程中只有第三步(将目的基因导入受体细胞)没有碱基互补配对现象:
第一步存在逆转录法获得DNA,第二步存在黏性末端连接现象,第四步检测存在分子水平杂交方法。;;
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