6第六讲-第三章 实验动物学微生物控制PPT.pptVIP

药物或其它物质的毒理作用常常与肠道细菌代谢产物有关。如普通豚鼠对青霉素敏感，而无菌豚鼠则相反。 研究证明，青霉素过敏是因肠道菌代谢过程引起的过敏，通过对无菌动物的研究，可准确地分析出各种物质的毒理作用。 9、毒理和药理学研究 免疫缺陷动物-裸鼠，在无屏障环境下极易感染，很难饲养繁殖，只有在屏障系统中这些动物才能生存、繁衍。 在临床上利用无菌技术诞生了“净化医学”，使无菌环境在临床上得到广泛应用，美国患者Darid患联合免疫缺陷病(SCID要与AIDS相区别)，剖腹产后养育在无菌环境中生活了12年。 10、无菌技术在生物医学中的应用 将肿瘤病人置入屏障系统内，便能承受高剂量抗癌药物治疗，又可减少因免疫系统损害而引起感染。 将烧伤病人置于无菌隔离室内，可防止病人因皮肤破坏引起细菌感染而导致败血症。 器官移植病人为防止术后感染都必须生活在无菌隔离室。 一、基本概念： 悉生动物(gnotobiatics,GN)又称已知菌动物、指定菌动物。是指动物体内外带有已知微生物的动物。 悉生动物是在无菌动物基础上，人为地将某一种或多种微生物植入到无菌动物机体内而形成的。 第二节 悉生动物（GN、GNA） 单菌动物(monognotoxenic)， 双菌动物(dignotoxenic)， 三菌动物(trignotoxenic)， 多菌动物(polygnotoxenic)， 不同国家的已知菌动物所带的细菌种类与数量不尽相同，见表3-1。 根据植入的细菌数不同可分为 菌 种 日 本 法 国 美 国 中 国 大肠埃希氏杆菌 表皮葡萄球菌 白色葡萄球菌 粪链球菌 乳酸杆菌 脆弱拟杆菌 双歧杆菌 费新尼亚梭菌 √ √ ? √ √ √ √√ ? √ √ √ ? ? ? ? √ √√ √ √ √ √ √ √ √√ √ √ 表3-1 在已知菌动物中各国植入的细菌 悉生动物来源于无菌动物，其体内、外有已知种类的细菌定居，形成了动物与微生物的共生复合体。 悉生动物肠道内存在能合成某种维生素和氨基酸的细菌。 悉生动物的生活力较无菌动物强，抗病力明显增强，也易于饲养管理。 二、悉生动物的特性 在有些实验中，悉生动物可以作为无菌动物的替代动物。 如中国药检所的五联菌悉生动物是将大肠埃希氏杆菌、表皮葡萄球菌、白色葡萄球菌、粪链球菌和乳酸杆菌等5种细菌接种到无菌小鼠，可代替无菌小鼠进行药物检定。 在免疫学实验中，无菌动物不发生过敏反应，而感染一种大肠杆菌的悉生动物就会出现过敏反应。 CHANGCHUN UNIVERSITY OF SCICENCE AND TECHNOLOGY 长春理工大学 机械电子工程专业 第七节 实验动物的遗传（质量）监测 一、遗传标记的概念及其发展 1、遗传标记（Genetic Marker）的概念 遗传标记是指在遗传分析上用作标记的基 因，也称为标记基因。 遗传标记是一些等位基因或遗传物质，能在 动物体上以各种形式表现出的各种变异。 遗传标记的概念经历了从宏观到微观、从外 部到内部、从蛋白质到DNA的发展过程。 2、遗传标记概念的发展 ①形态学标记 能用肉眼观察和识别的外部性状。例如，动物 的毛色、角形、耳型、体型、外貌等。此法简单 直观，但标记数目少、多态性低、易受环境影响。 ②细胞遗传标记 主要是指染色体核型、带型和数量的变异等。此 法能反映出染色体结构和数目的多态性，但由于这 些变异往往带来有害的表型效应，生物难以忍受。 ③免疫遗传标记 以动物的免疫学特征为标记，主要是红细胞抗原 多态性和白细胞抗原多态性。 红细胞抗原多态性——血型，以细胞表面的抗原而定 白细胞抗原多态性——主要组织兼容性复合体（MHC），以白细胞表面的抗原而定。 ④生化遗传标记（蛋白质多态性标记） 同一种动物中，具有相同功能的蛋白质存在两种以上的变异体，有些可以用电泳方法区分其中的差异 ⑤分子遗传标记 ○分子遗传标记是以DNA多态性为基础的遗传标记，又称DNA分子标记或多态性DNA标记。 ○自20世纪70年代以来，随着分子生物学的发展，相继建立了多种分子遗传标记检测技术，例如，RFLP、VNTR、RAPD、AFLP、SNP等 ○分子遗传标记的特点：遗传多态性高；检测方法简单快捷；遗传共显性，能分离出等位基因的三种基因型。 二、近交系的遗传监测 （一）形态学方法(形态学标记) （二）生化标记监测法 （生化遗传标记、蛋白质多态性标记） （三）免疫学方法（免疫遗传标记） （四）分子生物学技术（分子遗传标记） 实验动物微生物学质量控制的标准化是实验动物标准化的主要内容之一。 按微生物学控制标准，我国将实验动物分为四类，即： ①普通级动物（CV） ②清洁级动物（C