分子生物学课件 第六章 转录与逆转录PPT.pptVIP

※穷追模型 抗终止： 定义： 由于不同生理要求，转录过程中有时即 使遇到终止信号，仍需要继续转录的现象 两种类型： 破坏终止位点RNA的发夹结构：当介质中某一氨基酸的浓度较低时，缺乏相应氨酰-tRNA，将致使核糖体滞留在串联密码子上，mRNA不能形成特定的二级结构，末端发夹结构被破坏，因此转录仍将继续进行，出现抗终止现象。 依赖于蛋白质因子的转录抗终止：蛋白复合物形成后，将会改变聚合酶的构象，使之对终止信号不敏感，从而抗终止。 五 转录调控 真核生物启动子对转录影响 原核生物启动子对转录影响 转录的抑制 利福霉素（利福平）：专一结合原核生物 RNA聚合酶β亚基 嘌呤、嘧啶类似物： 与DNA模板结合改变模板功能：烷化剂、放线菌素、嵌入染料 与RNA聚合酶结合影响活性：利福霉素、利链菌素、α-鹅膏蕈碱 ※ α-鹅膏蕈碱：真核RNA聚合酶Ⅱ抑制剂 六 内含子的转录后加工 真核RNA内含子总述： 真核的断裂基因：外显子与内含子相间 真核内含子的结构：GT-AG ※原核：tRNA、rRNA需加工，mRNA不加工 真核：三种RNA都需加工 hnRNA是mRNA的前体：RNA聚合酶Ⅱ催化下， 生成hnRNA，经5’加帽，3’加尾，连接外显子 入质，成mRNA hnRNA内含子的剪接（hnRNA→mRNA） hnRNA的内含子上几个剪切位点（剪接因子结合位 点）： GU-AG：所有内含子结构都是5’GU…AG3’ 3’AG的剪接效率：CAG=UAGAAGGAG 3’AG附近嘧啶区：10-20个嘧啶核苷酸 5’保守序列：GUPuAGU 分叉剪接内含子3’上游18-50处：Py80NPy87Pu75APy95保守区，A有2’-OH hnRNA内含子GU-AG的剪接机理 * 第六章 转录与逆转录 重难点 转录后加工、真原核转录过程、增强子、终止与抗终止、RNA聚合酶（真原核）、转录起始复合物 ㈠转录 一 转录的定义与特点 1.转录的定义：以DNA为模板，在依赖DNA的 RNA聚合酶的催化下，以4种 NTP（ ATP、CTP、GTP和UTP ） 为原料，合成RNA的过程。 2.转录的特点： 转录的不对称性：在RNA的合成中，DNA的两条链 中仅有一条链可作为转录的模 板。且多基因DNA中正负链可 相间排列 转录单向性：RNA5’→3’合成 转录连续性：共线性，RNA与DNA序列一一 对应,RNA链连续合成 有特定起始、终止位点：启动子、终止子 双链DNA转录能力大于单链：RNA聚合酶与双链结合后活性高于单链 不需完全开链：只需部分解链，最后DNA 还是双链 ※几个概念 1.正链：与mRNA序列相同（T→U）的那条DNA链,编 码链（有义链） 负链：根据碱基互补原则指导mRNA合成的 DNA链,模板链（反义链） 2.转录单元：一段从启动子开始至终止子结 束的DNA序列，转录的功能单元 3.启动子：一段位于结构基因5’端上游区的DNA序 列，能活化RNA聚合酶，特异识别模板 4.终止子： ※RNAPol识别启动子后 先一下合成子链（RNA）上多个核苷酸 当合成的子链核苷酸9个时，可继续复制 当合成的子链核苷酸9个时,因未到RNAPol结合位点 RNAPol结合不稳，易脱落，不继续转录 2.转录起始：RNA链上第一个核苷酸键产 生，不需引物 ※σ因子：原核RNA聚合酶亚基，促进原核 RNA聚合酶ββ’亚基与DNA模板启 动子结合 ρ因子：与终止子作用，终止转录 依赖ρ因子的终止 3.转录延伸：RNA聚合酶释放σ因子，核心酶 沿着模板DNA移动并使新生RNA 链不断伸长的过程。 4.转录终止：当RNA链延伸到终止位点时， RNA停止合成，转录泡瓦解， DNA链复原，新生RNA链和RNA 聚合酶将被释放下来。 ※转录所需的酶与复合物 RNA聚合酶：是转录过程中最关键的酶，主 要以双链DNA为模板，以4种核 苷三磷酸作为活性前体，