十四章细胞融合续PPT.pptVIP

2-2、细胞学染色体形态和数目的比较;18条染色体;第七节 细胞融合技术应用举例 ; * 1972年，美国卡尔逊开发出杂种烟草。 * 1978年，德国梅歇尔斯首次将马铃薯与番茄细胞融合成功，称“泡马豆”。 * 1978年，瑞士埃勒门斯和美国柯路斯将人纤维肉瘤细胞与小鼠的畸胎瘤细胞融合后培育出含人体染色体的小鼠。 ;人纤维肉瘤细胞与小鼠畸胎瘤细胞融合;动物细胞融合过程;制备单克隆抗体（McAb）过程： 动物免疫→ 细胞融合→ 选择杂交瘤→ 检测抗体→ 杂交瘤细胞的克隆化→ 冻存及单克隆抗体的大量生产 ;体液免疫应答;单克隆抗体制备过程示意图;杂交瘤技术过程: 免疫动物 融合细胞的制备 两种细胞杂交融合 分装培养 抗体检测 杂交瘤细胞的克隆 冻存及单克隆的大量生产;免疫动物;杂交瘤细胞的克隆 有限稀释法: 检测到有抗体产生，待到杂交瘤细胞长满小孔的1/3-1/2时，用20%BSA的HAT培养液将其稀释成5个细胞/0.2ml和1个细胞 /0.2ml，另外重新接种，每孔0.2ml，5% CO2培养箱37℃培养；检察抗体。一般情况下，一个融合的细胞株，需要作三次以上的有限稀释培养，时间在2周左右，才能得到稳定的单克隆抗体细胞株。 软琼脂法: 配制含0.5%琼脂的上述HAT培养基，用1-5个细胞/0.2ml的细胞液在培养皿中接种，5% CO2培养箱37