艾灸血清对实验性的ra滑膜细胞增殖和细胞周期的影响.docx

成都中医药大学硕士学位论文LPSPKCPLCγ-1OARFNF-КbAP-1CdksINK4Lipopolysaccharidesproteinkinase Cphospholipase Cγ1osteoarthritisrheumatoid factornuclear factor КBactivator protein-1cyclin dependent kinaseinhibitor of CDK4脂多糖蛋白激酶 C胃黏膜细胞磷脂酶 Cγ-1骨关节炎类风湿因子核转录因子КB转录因子活化蛋白-1周期素依赖性蛋白激酶细胞周期素依赖性蛋白酶CDK4 的抑制因子8成都中医药大学硕士学位论文附件 3 申 明硕士学位论文《艾灸血清对实验性 RA 滑膜细胞增殖和细胞周期的影响》是本人在成都中医药大学攻读硕士学位期间在导师指导下完成的，该论文涉及的有关知识产权归成都中医药大学所有。有关该学位论文成果的开发、转让、论文发表等，均需征得导师和成都中医药大学同意。硕士生签名：导 师 签 名：2008 年月日54成都中医药大学硕士学位论文引言类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis, RA)是一种以慢性对称性多关节炎表现为主的全身性自身免疫疾病。其主要表现为受累关节疼痛、肿胀，病变呈持续反复发作，晚期可出现关节强直和畸形。类风湿关节炎除了表现为典型的关节症状外，心、肺、肾、动脉、神经及眼等脏器也可受累。［1］在我国，RA 的发病率约为 0.36％左右。结缔组织病转归的五“D”，即残疾（disability），痛苦（discomfort），死亡（death），经济损失（dollar lost），药物中毒（drugtoxicity），在类风湿关节炎中尤为突出。因此，寻找疗效确切、毒性轻微的治疗方法一直是类风湿性关节炎研究的热点。RA 的发病机制尚不清楚，研究结果显示，多基因和环境因素共同诱发病理性自身免疫反应，并导致 RA 表现以破坏性多关节炎和不同的关节外炎症病变。［2］RA 的主要病理特征为持续性的滑膜炎症，滑膜细胞在滑膜炎症过程中始终处于核心地位。［3］滑膜炎症反应表现为滑膜细胞过度增生，炎性细胞浸润，血管翳形成，软骨和骨组织的侵蚀和破坏，最终导致关节结构破坏、畸形和功能丧失。滑膜细胞分为 A 型（即巨噬细胞样滑膜细胞，约占 20—30%）、B 型（即成纤维样滑膜细胞，约占 70—80%，为分泌性细胞）和 C 型（介于 A、B 型之间，即中间型滑膜细胞）三类，其中成纤维样滑膜细胞（FLC）在 RA 病理过程中最为重要，其来源于间质细胞。虽然在体内成纤维样滑膜细胞与血管翳细胞有一定的区别，但在体外分离和培养后，滑膜各层的成纤维样滑膜细胞和血管翳细胞几乎没有区别。成纤维样滑膜细胞除了参与滑膜组织对关节软骨破坏及关节周围的骨组织破坏之外，还分泌多种细胞因子间接参与对骨与软骨的损害。在体外，类风湿性关节炎的成纤维样滑膜细胞所具有分泌上述细胞因子的功能能够维持数代。所［4］细胞周期或称细胞增殖周期是指增殖细胞从一次分裂结束到下一次分裂结束所经历的时期和顺序变化。细胞依次经过 G1（DNA 合成前期）→S（DNA 合成期）→G2（DNA 合成后期）→M（有丝分裂期）而完成其增殖。［5］ RA 成纤维样滑膜细胞增生活跃，具有转化特性，能够形成肿瘤样结节，侵蚀软骨机制，造成关节破坏。c-myc 等多种基因表达异常引起滑膜细胞周期失控，Gas6/Ax1、Bcl-2 表达9以，抑制成纤维样滑膜细胞增殖是治疗类风湿性关节炎的手段之一。成都中医药大学硕士学位论文增加和 p53 基因突变可导致细胞凋亡能力下降，从而促进滑膜细胞增生。因此，调节细胞周期和诱导滑膜细胞凋亡以抑制滑膜细胞增生为治疗 RA 提供了新的方向。［6］目前现代医学对于 RA 还缺乏有效的治疗手段，一般性治疗疗效不高；药物治疗存在停药反复，长期使用损害肝肾的副作用；外科手术可以使病情暂时缓解和恢复某些大关节功能，但却不能阻止病情发展，并且给病人带来极大的痛苦。［7］大量临床资料显示，针灸治疗 RA 效果良好，采用多种针灸治疗方法，如针刺、麦粒灸、温针等治疗 RA 均可取得较为满意的疗效，尤其是在控制 RA 活动性及早［具有良好的抗炎、镇痛和免疫调节等作用。［14－18］关于针灸治疗 RA 的机理研究也取得了一定进展，但以往的实验研究主要集中在针灸调整机体免疫功能、影响皮质醇的分泌、改善血液流变学和微循环、抗自由基损伤及对镇痛、病理形态学等方面，而对 RA 的关键病理环节缺乏足够的重视，因此，有必要从 RA 滑膜细胞这一关键环节入手，对针灸治疗 RA 的机制进行更深入的研究。近年来“针灸血清”研究方法的提出［19］，为深入研究针灸的作用原理提供了重要的思路和方法。大量实验证明［20，21］