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[实验] 探究影响酶活性的因素.doc
〖实验7〗〖酶经典实验〗(补充)
实例1(高效性):比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率P78
一.实验原理:
鲜肝提取液中含有过氧化氢酶,过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算,质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+数,大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。
二、方法步骤:
步骤 注意问题 解释 取4支洁净试管,编号,分别加入2mL H2O2溶液 1.不让H2O2接触皮肤 1.H2O2有一定的腐蚀性 将2号试管放在900C左右的水浴中加热,观察气泡冒出情况,与1号对照 2号试管比1号试管放出的气泡多。这一现象说明加热能促进过氧化氢的分解,提高反应速率。 向3号、4号试管内分别滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝脏研磨液,观察气泡产生情况 2.不可用同一支滴管
3.肝脏研磨液必须是新鲜的
4.肝脏在制成研磨液 2.由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶,会影响实验准确性
3.因为过氧化氢酶是蛋白质,放置过久,可受细菌作用而分解,使肝脏组织中酶分子数减少,活性降低
4.研磨可破坏肝细胞结构,使细胞内的酶释放出来,增加酶与底物的接触面积 2-3min后,将点燃的卫生香分别放入3号和4号试管内液面的上方,观察复燃情况 5.放卫生香时,动作要快,不要插到气泡中 5.现象:
3号试管产生气泡稍多而小,冒泡时间长,卫生香复燃;
4号试管产生气泡极多而大,冒泡时间短,卫生香猛烈复燃(避免卫生香因潮湿而熄灭) 实例2:下面是验证唾液淀粉酶专一性的实验设计。
已知:⑴ 滴加斐林试剂水浴后若出现砖红色沉淀,证明还原糖的存在;
⑵ 唾液淀粉酶将淀粉水解成麦芽糖,但不能水解蔗糖成为葡萄糖和果糖。麦芽糖、果糖、葡萄糖具有还原性,淀粉和蔗糖不具有还原性。
加入物质 试管号 1 2 3 4 1%淀粉溶液(滴) 4 — 4 — 2%蔗糖溶液(滴) — 4 — 4 稀释的唾液(滴) — — 1 蒸馏水(滴) 1 1 — 恒温处理15min 37℃ 37℃ 37℃ 37℃ 斐林试剂(滴) 1 1 1 1 沸水浴(min) 3 3 3 3 砖红色沉淀 — — + — ⑴ 表中的3号试管和4号试管各留下了一处空白,你认为3号试管的空白处的处理应是________,4号试管的空白处的处理应是____,其理由是
_ 。
⑵ 实验中1号和2号试管起____作用。
⑶ 实验结果说明__号试管内有还原性糖的存在。
⑷ 本实验中保持试管温度为37℃的理由是_____________________________________。
答.⑴ 加入1滴唾液;不加水;保证每试管有等量的物质,从而证明实验结果的差异是由唾液淀粉酶的作用引起的⑵ 对照 ⑶ 3 ⑷ 唾液淀粉酶在37℃左右时催化效率最高
〖实验7〗探究影响酶活性的因素((B1C5S1,P78、P83))
一.实验目的:
1.探究不同温度和PH对过氧化氢酶活性的影响。 2.培养实验设计能力。
二、实验假设:
1.不同温度会影响酶的活性; 2.不同PH会影响酶的活性。
〖☆探究性实验程序〗 1.提出问题→2.作出假设→3.设计实验(包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格)→4.实施实验→分析与结论→表达与交流。
实例3:温度对酶活性的影响
一)实验目的:
1.初步学会探索温度对酶活性的影响的方法。2.探索淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。
二)实验原理:
1.淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。
2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖(淀粉水解过程中,不同阶段的中间产物遇碘后,会呈现红褐色或红棕色。)麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。注:市售a-淀粉酶的最适温度约600C
操作 注意问题 解释 取3支试管,编上号,然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液 另取3支试管,编上号,然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液 将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组,分别放入热水(约600C)、沸水和冰块中,维持各自的温度5min 在同一组不能用不同温度处理淀粉溶液和酶溶液 防止混合时,由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化,反应温度不是操作者所要控制的温度,影响实验结果。 分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后,维持各自的温度5min 保持各自温度时间不能太短 淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间 在3支试管中各滴入1-2滴碘液,摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录 碘液不能滴加太多 防止影响实验现象的观
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