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医学微生物实验 7年病毒感染检查qhua.pptVIP

医学微生物实验 7年病毒感染检查qhua.ppt

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医学微生物实验 7年病毒感染检查qhua

. 病毒感染的检查 标本的采集与送检 用于分离培养的标本: a、采集急性期标本 b、采集感染部位标本 c、冷藏 血清学诊断的标本: 急性期和恢复期双份血清,-20℃保存 . 一、检测活病毒 病毒的分离培养与鉴定 1.最常用细胞培养 2.鸡胚接种:主要用于流感病毒的分离 3.动物接种少用:主要用于狂犬病病毒 乙型脑炎病毒的分离 常用的细胞培养 . 二、检测病毒抗原与抗体 已知抗体测病毒感染脱落细胞或分泌物细胞中的抗原 已知抗原测血清中抗体测IgM,或动态测IgG(双份血清) 三、检测病毒核酸 PCR试验 引物 核酸杂交试验 探针 基因芯片技术 * * 动物接种 鸡胚接种 组织培养 器官培养 移植培养 细胞培养 原代细胞培养 二倍体细胞培养 传代细胞培养 一、检测活病毒 (一)三大培养方法 (二)病毒在细胞内增殖的指标 1、CPE 2、红细胞吸附 正常细胞 病变细胞 狂犬病毒包涵体(Negri body) 3.包涵体 巨细胞病毒包涵体 4.免疫技术 (三)病毒数量和感染性测定 1、蚀斑试验 2、ID50 或 TCID50 病毒感染鸡胚、动物或细胞后,引起 50% 发生死亡或病变的最小量。 病毒感染单层细胞后,产生的局限性病灶,称蚀斑,蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的,称蚀斑形成单位,病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位PFU来表示。 病毒的快速诊断 光镜-----包涵体 电镜 免疫荧光 ELISA 分子生物学技术 杂交 Southern blot PCR Northern blot * *

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