植物生理学试验指导.DOC

17个植物生理实验指导 目 录 植物材料的采集、处理与保存 3 实验一 拟南芥种植和形态观察 8 实验二 植物细胞的活体染色和死活的鉴定 11 实验三 植物细胞渗透势的测定（质壁分离法） 13 实验四 植物组织水势的测定（小液流法） 16 实验五 植物根系活力的测定（TTC法） 18 实验六 根系总吸收面积和活跃吸收面积的测定 20 实验七 离体叶绿体的制备以及完整度的测定 22 实验八 叶绿体色素的提取、分离和理化性质 27 实验九 植物叶片光合速率的测定（改良半叶法） 31 实验十 小篮子法（广口瓶法）测定植物的呼吸速率 34 实验十一 谷物淀粉含量的测定（旋光法） 36 实验十二 类似生长素对种子萌发的影响 38 实验十三 赤霉素对α-淀粉酶的诱导形成 39 实验十四 植物光周期现象的观察 41 实验十五 植物抗逆性的测定（电导仪法） 42 实验十六 脯氨酸含量的测定 44 试验十七 植物原生质体的分离和融合 46 主要参考文献 49 物材料的采集、处理与保存 植物生理实验使用的材料非常广泛，根据来源可划分为天然的植物材料（如植物幼苗、根、茎、叶、花等器官或组织等）和人工培养、选育的植物材料（如杂交种、诱导突变种、植物组织培养突变型细胞、愈伤组织、酵母等）两大类；按其水分状况、生理状态可划分为新鲜植物材料（如苹果、梨、桃果肉，蔬菜叶片，绿豆、豌豆芽下胚轴，麦芽、谷芽，鳞茎、花椰菜等）和干材料（小麦面粉，玉米粉，大豆粉，根、茎、叶干粉，干酵母等）两大类，因实验目的和条件不同，而加以选择。 植物材料的采集和处理，是植物生理研究测定中的重要环节。在实际工作中，往往容易把注意力集中在具体的仪器测定上，而对于如何正确地采集和处理样品却不够注意，结果导致了较大的实验误差，甚至造成整个测定结果的失败。因此，必须对样品的采集、处理与保存给予足够的重视。 原始样品及平均样品的采取、处理 植物生理研究测定结果的可靠性（或准确性），首先取决于试材对总体的代表性，如果采样缺乏代表性，那么测定所得数据再精确也没有意义。所以，样品的采集除必须遵循田间试验抽样技术的一般原则外，还要根据不同测定项目的具体要求，正确采集所需试材。目前，随着研究技术的不断发展，应该不断提高采样技术的水平。 在作物苗期的许多生理测定项目中都需要采集整株的试材样品，在作物中后期的一些生理测定项目中，如作物群体物质生产的研究，也需要采集整株的试材样品，有时虽然是测定植株的部分器官，但为了维持器官的正常生理状态，也需要进行整株采样。 除研究作物群体物质生产外，对于作物生理过程的研究来说，许多生理指标测定中的整株采样，也只是对地上部分的采样，没有必要连根采样，当然对根系的研究测定例外。采样时间因研究目的而不同，如按生育时期或某一特殊需要的时间进行。除逆境生理研究等特殊需要外，所取植株应是能代表试验小区正常生育无损伤的健康植株。 为了保证植物材料的代表性，必须运用科学方法采取材料。从大田或实验地、实验器皿中采取的植物材料，称为“原始样品”，再按原始样品的种类（如植物的根、茎、叶、花、果实、种子等）分别选出“平均样品”，然后根据分析的目的、要求和样品种类的特征，采用适当的方法，从“平均样品”中选出供分析用的“分析样品”。 （一）原始样品的取样法 1. 随机取样 在试验区（或大田）中选择有代表性的取样点，取样点的数目视田块的大小而定。选好点后，随机采取一定数量的样株，或在每一个取样点上按规定的面积从中采取样株。 2. 对角线取样 在试验区（或大田）可按对角线选定五个取样点，然后在每个点上随机取一定数量的样株，或在每个取样点上按规定的面积从中采取样株。 （二）平均样品的取样法 1. 混合取样法 一般颗粒状（如种子等）或已碾磨成粉末状的样品可以采取混合取样法进行。具体的做法为：将供采取样品的材料铺在木板（或玻璃板、牛皮纸）上成为均匀的一层，按照对角线划分为四等分。取对角的两份为进一步取样的材料，而将其余的对角两份淘汰。再将已取中的两份样品充分混合后重复上述方法取样。反复操作，每次均淘汰 50 ％的样品，直至所取样品达到所要求的数量为止。这种取样的方法叫做“四分法”。 一般禾谷类、豆类及油料作物的种子均可采用这个方法采取平均样品，但注意样品中不要混有不成熟的种子及其他混杂物。 2. 按比例取样法 有些作物、果品等材料，在生长不均等的情况下，应将原始样品按不同类型的比例选取平均样品。例如对甘薯、甜菜、马铃薯等块根、块茎材料选取平均样品时，应按大、中、小不同类型的样品的比例取样，然后再将每一单个样品纵切剖开，每个切取 1/4 、 1/8 或 1/16 ，混在一起组成平均样品。 在采取果实的平均样品时，如桃、梨、苹果