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现代育种原理和实践
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第十八章 现代生物技术与动物育种
现代生物技术主要指受DNA重组技术影响最为深刻的生物技术领域。20世纪80年代以来,现代生物技术领域的研究和开发非常活跃,发展十分迅速,无论基础研究领域还是在应用开发方面,都取得显著的成就。现代生物技术是一门分支众多、涉及多学科的综合性技术,研究成果越来越广泛地应用于农业、医药业、工业、环保等领域,而且某些领域的研究成果已进入商业化阶段。与动物育种有关的现代生物技术包括转基因技术、胚胎工程技术、动物克隆技术、分子遗传标记技术等。随着现代生物技术的发展,传统育种方法所不能克服的技术难题逐渐找到了新的解决途径。在传统畜禽育种方法基础上,结合应用现代生物技术手段,可以大大加快育种进展。
第一节 生物技术概论
与动物育种有关的现代生物技术包括动物转基因技术、胚胎工程技术、动物克隆技术及其他以DNA重组技术为基础的各种技术等。通过概要了解生物技术内容和发展现状,重点介绍细胞层面和分子层面生物技术的基本原理、进展及其在动物遗传改良中的应用现状和前景,为进一步探索现代生物技术在动物育种中的实际应用途径提供轮廓性资料。
一、生物技术概念
生物技术一词最初是由匈牙利工程师Karl Ereky于1917年提出的,当时所指涵义是:用甜菜作为饲料进行大规模养猪,即利用生物将物料转变为产品。从这个意义上讲,现代畜牧业的全部内容都属于生物技术的范畴。随着生物技术的迅速发展,1982年国际合作及发展组织对生物技术的涵义进行了重新定义,即生物技术是应用自然科学及工程学原理,依靠微生物、动物、植物作为反应器,将物料加工以提供产品来为社会服务的技术,其中包括四个不可分割的技术环节,即生物技术所依据的原理、生物反应器、物料加工和服务社会的产品。
生物技术一般包括基因工程、细胞工程、微生物工程(发酵工程)和酶工程四个分支领域。它们之间互相渗透、互为补充、互为上下游,但这四项“工程”尚不能涵盖生物技术的全部内容。随着生物学和生物技术的长足发展,不断有一些新的内容出现,特别是人类基因组学、蛋白质组学、生物芯片、生物信息学等重大技术的出现,已经大大扩展了生物技术的内涵。
(一)基因工程
基因工程是在生物化学、分子生物学和分子遗传学等学科的研究成果基础上逐步发展起来的。可简单地理解为创造新生物并赋予新生物以特殊功能的技术,或者说DNA重组技术就是基因工程,其突出优点是打破了常规育种难以突破的物种之间的界限,可以使原核生物与真核生物之间、动物与植物之间、甚至人与其他生物之间的遗传信息进行重组和转移。人的基因可以转移到大肠杆菌中表达,细菌的基因可以转移到植物中表达。
基因工程的理论依据。①不同基因具有相同的物质基础。地球上的一切生物,从细菌到高等动物和植物,直至人类,它们的基因都是一个具有遗传功能的特定核苷酸序列的DNA片段。而所有生物的DNA基本结构都是一样的。因此,不同生物的基因原则上是可以重组互换的。虽然某些病毒的基因定位在RNA上,但是这些病毒的RNA仍可以通过反转录产生cDNA,并不影响不同基因的重组或互换。②基因是可切割的。基因直线排列在DNA分子上。除少数基因重叠排列外,大多数基因彼此之间存在着间隔序列(内含子)。因此,作为DNA分子上一个特定核苷酸序列的基因,允许从DNA分子上一个一个完整地切割下来。即使是重叠排列的基因,也可以把指定的基因切割下来,尽管破坏了其他基因。③基因是可以转移的。基因不仅是可以切割,而且生物体内有的基因可以在染色体DNA上移动,甚至可以在不同染色体间进行跳跃,插入到靶DNA分子之中。可见,基因不仅可转移,而且基因组是可以重组的。④多肽与基因之间存在对应关系。现在普遍认为,一种多肽就有一种与之相对应的基因。因此,基因的转移或重组可以根据其表达产物多肽的性质来检查。⑤遗传密码的通用性。一系列三联密码子(除极少数的几个以外)与氨基酸之间的对应关系,在所有生物中都是相同的。也就是说遗传密码是通用的,重组的DNA分子不管导入什么样的生物细胞中,只要具备转录翻译的条件,均能合成原样的氨基酸。即使人工合成的DNA分子(基因),同样可以转录翻译出相应的氨基酸。基因是可以人工合成的。⑥基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代。经重组的基因一般来说是能传代的,可以获得相对稳定的转基因生物。
基因工程的基础是DNA重组技术,它建立在对核酸结构、功能和理化特性深入认识的基础上。基因工程的内容包括建立基因组DNA文库和cDNA文库、基因克隆、用限制性内切酶剪切DNA和重组DNA、基因转化、基因表达检测、分子杂交、DNA测序、基因敲除和基因敲入等基础研究内容。基因工程的应用范围主要包括基因工程药物、转基因动植物等方面。
另外,基因工程还延伸到基因的产物之一——蛋白质。在基因工程的基础上,结合蛋白
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