第七章植物细胞（组织）与动物细胞培养反应器.ppt

第七章 植物细胞 (组织)和动物细胞培养反应器 第一节 植物细胞(组织)培养反应器 第二节 动物细胞培养反应器 第三节 微藻培养反应器 自学 教学目的与要求： 1、了解动植物细胞培养反应器的种类 2、掌握常用的动植物细胞培养反应器的结构、特点。 重点与难点： 动植物细胞培养反应器的类型、结构和特点。 思考题 1.动物细胞培养操作方式? 2.微载体培养的优点? 3.微囊系统的制作过程? 4.动物细胞的大规模培养系统？ 第一节 植物细胞(组织)培养反应器 广义的植物细胞培养技术包括植物器官(根、枝叶、发根、胚、冠瘿组织等)，组织、细胞以及原生质体培养，并以此发展起来的各种植物细胞培养技术。 反应器研制是植物细胞(组织)培养工业化的关键。与不同的植物组织的不同生理、代谢方式有关，也与不同的培养方式有关。介绍植物细胞(组织)培养反应器的研制情况。 一、植物细胞培养过程的特点 1.细胞培养液的性质 植物细胞比微生物细胞大得多，低倍镜可观察到。如烟草细胞，比微生物细胞大50~100倍，细胞体积膨大一万到十万倍，细胞可占培养液体积的40%~50%，培养过程形态变化明显。 培养液的黏度与微生物发酵液不同，烟草细胞对数生长期的黏度是培养初期的30倍 2.植物细胞培养中的传递状态 耗氧培养中，必须要通风搅拌，氧传递是关系发酵成本的主要因素。对于植物细胞也存在同样是问题。 研究证明，培养烟草细胞氧消耗比速度的最大值为0.6mmol/(g干菌体/h),比微生物要低1.5~8mmol/(g干菌体/h)得多. 二、植物细胞培养反应器 植物细胞培养 采用两种系统： 悬浮培养 机械搅拌和非机械搅拌反应器 固定化培养 填充床 流化床和膜反应器 1.悬浮培养反应器： ⑴机械搅拌反应器 日本最早1972培养烟草细胞获取尼古丁 下图是目前最大的植物细胞培养反应器装置 ⑵非机械搅拌反应器 一般为气体搅拌 鼓泡式反应器 气升式反应器 内循环 外循环 如图 很多研究表明，气体搅拌反应器尤其是气升搅拌反应器十分适合植物细胞培养与次级代谢产物的生成。 我国刘大陆、查丽杭，八.五期间发明气升内错流反应器生产紫草宁，细胞量达12gdw/L，紫草宁含量达细胞干重的10%，是天然植株含量的2~8倍。 如图是新疆紫草细胞培养流程 一般认为，气体搅拌反应器结构简单，传氧速率高以及剪切力低，更适合于植物细胞培养，同时需结合植物细胞生长代谢特性对其加以改造更适合植物细胞的培养。 2.固定化细胞生物反应器 植物细胞培养的关键细胞遗传和生理的稳定性。固定化细胞培养系统比悬浮培养更适合于植物细胞团的培养。已成功用于培养辣椒、胡萝卜、长春花、毛地黄等植物细胞。 固定化培养反应器 植物细胞反应器的放大 一般以相同的体积溶氧传递系数kla作为依据。同时考虑合理的搅拌强度。 目前没有标准。 三、植物组织培养反应器： 在植物组织培养系统发展较快的有： 1.发状根大规模培养系统 如图 2.小植物的大规模快速培养 从两条不同途径考虑采用组织培养反应器进行植物的快速繁殖。 a.形成不定芽的途径 从植株茎尖诱导不定芽后，在反应器大规模培养不定芽或不定根。 b.形成胚状体的途径 从植株外植体诱导胚性愈伤组织得到体胚，然后在反应器内大规模培养体胚，最终制成人工种子。 自1981年报道培养矮牵牛后，已进行草莓、香蕉苗、百合、兰花、唐菖蒲等的茎、芽、微小块茎、球茎、体细胞、小植物和合成种子的大规模培养，规模达1000L。 华南理工大学和中科院华南植物所合作开发适合香蕉高经济作物的浅层循环式植株快速繁殖器，获得实用新型专利。 中科院冶金所应用径向流生物反应器培养唐菖蒲原球茎 第