第四章 发酵工程 FERMENTATION ENGINEERING.pptVIP

2.3.2 种子扩大培养（种子制备） 先进行活化，再扩大培养：将保存在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养而获得一定数量和质量的纯种过程 一个由实验室制备到车间生产的过程 目的：使菌体在短时间内快速增殖，培养出具有高质量的生产种子供发酵生产使用 * 2.3.3 发酵 发酵工艺的调控是整个发酵工程最核心最重要的部分 是在无菌状态下完成纯种培养的过程，因此，各个环节都需保持无菌，包括：培养基、培养设备、通入的空气和中途的补料、转移的种子等等 * 发酵方式 液体深层发酵：适合于大规模工业化生产。 固体发酵：适合于传统发酵工艺及乡镇企业用来生产比较简单的产品。 * 连续发酵是个开放的系统，通过连续流加新鲜培养基并以同样的流量连续排出发酵液，可使微生物细胞群体保持稳定的生长环境和生长状态，并以发酵中的各个变量都能达到恒定值而区别于瞬变状态的分批发酵。 * 所以才主要在研究工作中使用，具体的工业化生产并不采用这种方式。 * 它是一种传统的发酵方式，在简单分批发酵过程中，微生物的生长、各种营养物质的消耗和代谢产物的合成时刻处于瞬变之中，即整个发酵过程处于不稳定状态。 每进行一次培养都要经过灭菌、装料、接种、发酵、放料等一系列过程，因此，非生产时间长，生产成本较高。 * 技术介于两者之间，兼有两者的优点，又克服了它们的缺点。 可持续地共给菌体维持和生长所需的营养，故能保持发酵液中有较高的活菌体浓度；另外，不断的补料稀释，对降低发酵液黏度，强化好氧发酵的供氧，也十分有利。因此，补料分批发酵目前已广泛用于各种发酵产品的工业化生产中。 但由于发酵液的不断增加，受发酵罐操作容积的限制，发酵周期只能控制在较短的范围内。 在操作上它可分为简单分批发酵的生长阶段和补料分批发酵的生产阶段。 * 一般地，发酵罐容积越大，效率越高。 发酵罐是一种圆柱形的容器，容量从几升到几百万升不等，上面连接有通气、搅拌、接种、加料、冷却等装置；此外，还有对温度、pH、通气量与转速等发酵条件进行检测和控制的装置(如图)。 * 如： 目的产物是分泌到胞外的酶，则需从发酵液中提取；若产物为胞内酶，则需在细胞与发酵液分离之后，进一步破碎细胞，以释放出胞内物质，再利用其特定的理化性质制定相应的分离纯化方法，如离子交换、凝胶色谱等。 第四章 发酵工程FERMENTATION ENGINEERING * 发酵（fermentation)一词最初来自拉丁语“fervere”，是指酵母作用于果汁或发芽谷物时产生CO2的现象。 发酵工程：利用微生物(包括重组微生物)以及动植物细胞在适当条件下的大规模培养来生产商业产品。 * 发酵的基本概念 * FERMENTATION Process Control Fermentation engineering 上游工程 UPSTREAM PROCESSES 下游工程 DOWNSTREAM PROCESSES 发酵工程:从广义上讲，由三部分组成： 上游工程、发酵工程、下游工程 contents * 1 发展简史 外国 ● 公元前4000-3000年，古埃及人酿造酒、醋 ● 公元前2000年，古希腊人和古罗马人酿葡萄酒 ● 公元前三世纪，古巴比伦人用谷物酿啤酒 * 自然发酵的传统技术有：酒(白酒、黄酒、清酒、果酒、啤酒等)、醋、酱油、泡菜、奶酒、干酪、腐乳等 中国 ● 距今4200-4000年前，龙山文化时期即有酒器出现 ● 公元前1000多年前有酒、醋等的甲骨文文字记载 1.1自然发酵阶段 1.2纯培养技术的建立——第一个转折期 * 奠基人：安东尼.列文虎克、巴斯德、柯赫等 本时期产品：酵母、酒精、丙酮、有机酸、酶制剂等，主要为厌氧发酵和表面固体发酵的初级代谢产物。 科赫的世界第一 发明了细菌照相法；发现了炭疽热的病原细菌——炭疽杆菌，并提出著名的病原物诊断的科赫法则；证明了一种特定的微生物引起一种特定疾病的原因；分离出伤寒杆菌；发明了蒸汽杀菌法；分离出结核病细菌；发明了预防炭疽病的接种方法；发现了霍乱弧菌；提出了霍乱预防法；发现了鼠蚤传播鼠疫的秘密； * Robert Koch（1843—1910） 科赫法则(1884) 1.病原微生物总在患传染病的动物发现，而不存在于健康的个体中； 2.这一微生物可以离开动物体并被培养为纯种培养物； 3.这种纯种培养物接种到敏感的动物后，应当出现特有的病症； 4.该微生物可以从患病的实验动物中重新分离出来，并可在实验中再次培养，此后它仍然应该同原始病原菌微生物相同。 * 1.3深层通风培养技术——第二个转折期（30-50年代） * 1928年英国细菌学家弗莱明发现点青霉可产抑制葡萄球菌的青霉素，194