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基于SRAP—PCR分析百合鳞片DNA提取 　　摘要：采用改良的CTAB法从百合（Liliwn lancifolium Thunb.）鳞片中提取DNA，采用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳检测所提取的DNA质量，并进行SRAP-PCR分析。结果表明，改良的CTAB法提取的百合DNA A260 nm/A280 nm为1.69，浓度为0.30 μg/μL。琼脂糖胶电泳检测结果显示提取的DNA为清晰的条带，RNA去除干净，无降解现象。SRAP-PCR扩增产物多态性好，稳定性高，可用于遗传多样性分析。 　　关键词：百合（Liliwn）；鳞片；SRAP；DNA提取 　　中图分类号：Q523 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2012）21-4896-03 　　DNA Extraction from Squama Leaves of Liliwn lancifolium for SRAP-PCR Analysis 　　LI Jia-min，ZHOU Xiu-ling 　　（College of Chemical and Biological Engineering，Yichun University，Yichun 336000，Jiangxi，China） 　　Abstract： Modified CTAB method was applied to extract DNA from squama leaves of Liliwn lancifolium Thunb.. Ultraviolet spectrophotometry and agarose gel electrophoresis as well as SRAP-PCR were adopted to test the quality of extracted DNA. The results showed that A260 nm/A280 nm of DNA was 1.69， and concentration was 0.30 μg/μL. The agarose gel electrophoresis showed that the DNA had clear band without degradation or RNA. The SRAP-PCR product was with good polymorphism and stability， which could be used for genetic polymorphism analysis of Liliwn. 　　Key words： Liliwn； squama leaves； SRAP； DNA extraction 　　相关序列扩增多态性（Sequence-related amplified polymorphism，SRAP）标记因具有简便高效、快速稳定、共显性和重复性好、便于克隆目标片段等优点而备受青睐，目前已成功地应用于作物遗传多样性分析、遗传图谱的构建、重要性状的标记以及相关基因的克隆等。中药百合来源于百合科植物卷丹（Lilium tigrinum）、百合（L. brownii var. viridulum）、细叶百合（L. pumilum）的干燥肉质鳞叶[1]，具有养阴润肺、清心安神的功效，临床可用于阴虚久咳、痰中带血、虚烦惊悸、失眠多梦、精神恍惚等症的治疗。中国是百合的故乡，全世界百合属植物约有94个种，起源于中国的有47个种、18个变种[2]，其中36个种、15个变种为中国特有。但目前中国种植的百合多数是从国外引进的，而国内现有的百合资源尚未得到充分的利用，且破坏和流失现象十分严重。对百合??研究也主要集中于中药材品种基源的整理以及化学成分的分析。为了充分发挥中国丰富的百合资源优势，进行中药百合的遗传育种，利用RAPD、SSR、AFLP等分子标记研究百合遗传多样性已有报道[3，4]。这些研究中所用百合基因组DNA主要提取自百合幼嫩鳞叶，采样受到季节限制。百合鳞片的采样不受时间限制，但含有较多的次生代谢产物，提取高质量的DNA有一定难度。本研究采用CTAB法从百合鳞片中提取总DNA，检测所提取DNA的浓度和纯度，为SRAP分析以及百合品种亲缘关系的研究奠定基础。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　卷丹百合（Liliwn lancifolium Thunb.）鳞片采集于江西万载县白水乡。新鲜百合鳞片清水冲洗后用70%（体积分数，下同）的乙醇消毒，无菌水冲洗3次，于-80 ℃冰箱保存备用。 　　主要仪器包括超低温冰箱（MDF-382E（N））、水浴锅（HH-4）、离心机（TGL-16B）、基因扩增仪（XP-G）、双稳定时电泳仪（DYY-6C）、紫外分光光度计（UV-