第十二章_细胞周期与.pptVIP

第十一章 细胞周期与细胞增殖 第一节 细胞周期 ●细胞周期概念及意义 ●细胞周期的测定 ●细胞周期的主要事件 ●其他细胞的细胞周期 ◆根据细胞周期运转的不同，可将多细胞动物的细胞分为三类： ①周期中细胞：细胞持续分裂，细胞周期连续运转。如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。 ②静止期细胞：细胞暂离开细胞周期，不进行细胞分裂，但在适当的刺激下可重新进入细胞周期，称G0期细胞，如淋巴细胞、肝、肾细胞等。 ③终端分化细胞：细胞分化程度很高，一旦成熟，则终生不再分裂的细胞，如神经、肌肉、多形核细胞等。 二、 细胞周期的测定 ◆脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法 对测定细胞进行脉冲标记、定时取材、利用放射自显影技术显示标记细胞，通过统计标记有丝分裂细胞百分数的办法来测定细胞周期。放射标记物为3H或者14C标记的TdR。现在可以用BrdU（溴脱氧尿嘧啶）取代3H-TdR标记细胞，然后用抗BrdU抗体进行免疫细胞化学反应进行检测。 ◆流式细胞仪测定法(Flow Cytometry) 流式细胞仪可以监测不同时间内细胞DNA含量变化，从而确定细胞周期的长短。 三、细胞周期的主要事件 ◆ G1期 与DNA合成启动相关，开始合成细胞生长所需要的多种蛋白质、RNA、碳水化合物、脂等，同时染色质去凝集。 ◆ S期 DNA复制与组蛋白合成同步，组成核小体串珠结构S期DNA合成不同步 ◆ G2期 DNA复制完成，在G2期合成一定数量的蛋白质和RNA分子 ◆ M期 M期即细胞分裂期，真核细胞的细胞分裂主要包括两种方式，即有丝分裂(mitosis)和减数分裂(meiosis)。遗传物质和细胞内其他物质分配给子细胞。 四、其他细胞的细胞周期 ◆植物细胞的细胞周期 ◆酵母细胞的细胞周期 ◆细菌的细胞周期 ◆胚胎细胞的细胞周期 植物细胞的细胞周期 植物细胞的细胞周期与动物细胞的标准细胞周期非常相似，含有G1期、S期、G2期和M期四个时期。 植物细胞不含中心体，但在细胞分裂时可以正常组装纺锤体。 植物细胞以形成中板的形式进行胞质分裂 酵母细胞的细胞周期 酵母细胞的细胞周期与标准的细胞周期在时相和调控方面相似 酵母细胞周期明显特点: 1.酵母细胞周期持续时间较短；2. 封闭式细胞分裂，即细胞分裂时核膜 不解聚；3.纺锤体位于细胞核内；4. 在一定环境下，也进行有性繁殖 芽殖酵母 budding yeast 裂殖酵母 Fission yeast 细菌的细胞周期 慢生长细菌细胞周期过程与真核细胞周期过程有一定相似之处。其DNA复制之前的准备时间与G1期类似。分裂之前的准备时间与G2期类似。再加上S期和M期，细菌的细胞周期也基本具备四个时期 细菌在快速生长情况下，如何协调快速分裂和最基本的DNA复制速度之间的矛盾 早期胚胎细胞的细胞周期 细胞分裂快,无G1期, G2期非常短,S期也短(所有复 制子都激活), 以至认为仅含有S期和M期 无须临时合成其它物质 子细胞在G1、G2期并不生长，越分裂体积越小 细胞周期调控因子和调节机制与一般体细胞标准的细胞周期基本是一致的 第二节 细胞周期同步化 ● 自然同步化 ●人工选择同步化 ●药物诱导法 一、自然同步化 如有一种粘菌的变形体plasmodia，疟原虫 增殖某些水生动物的受精卵：如海胆、海参、两栖类 抑制解除后的同步分裂：如真菌的休眠孢子移入适宜环境后，它们一起发芽，同步分裂。 某些受精卵早期卵裂 二、人工选择同步化 有丝分裂选择法：用于单层贴壁生长细胞。优点是细 胞未经任何药物处理，细胞同步化效率高。缺点是 分离的细胞数量少。 密度梯度离心法：根据不同时期的细胞在体积和重量上存在差别进行分离。优点是方法 简单省时，效率高，成本低。缺点是对大多数种类的细胞并不适用。 三、药物诱导法 DNA合成阻断法 ─ G1/S-TdR双阻断法：最终将 细胞群阻断于G1/S交界处。优点是同步化效率高， 几乎适合于所有体外培养的细胞体系。缺点是诱 导过程可造成细胞非均衡生长 分裂中期阻断法：通过抑制微管聚合来抑制细胞 分裂器的形成，将细胞阻断在细胞分裂中期。优点 是操作简便，效率高。缺点是这些药物的毒性相对 较大 第三节 细胞的增殖 ●有丝分裂 ●有丝分裂机制 ●减数分裂 一、有丝分裂 为了便于描述人为的划分为六个时期： 前期(prophase)； 前中期(premetaphase)； 中期(metaphase)； 后期(anaphase)； 末期(telophase)； 胞质分裂(cytokinesis)。 前期(prophase) ◆标志前期开始的第一个特征是染色质开始浓缩(conden