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改变胱抑素C实验参数对检验结果影响分析
改变胱抑素C实验参数对检验结果影响分析
[摘要] 目的 检验通过适当改变胱抑素C试验参数对试剂盒实验结果的影响。方法 收集覆盖试剂盒线性范围的标本在改变参数前后分别检验一次,并对前后两次结果分别进行配对t检验和线性相关与回归分析,对常数a与斜率b进行单样本均数t检验。结果 实验前后结果经配对t检验,t=1.81,P 0.05,无统计学意义,线性回归方程为Y=0.9981X-0.0364,r=0.9982,对常数a斜率b进行单样本均数t检验结果为ta=0.706330.05无统计学意义;tb=0.1518020.05无统计学意义。结论 胱抑素C适当改变试验参数前后对检验结果无影响,不影响试剂盒线性。
[关键词] 胱抑素C;改变试验参数;实验结果
[中图分类号] R446.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2014)10-0054-02
胱抑素C 是一种小分子蛋白[1],也被称为γ-微量蛋白及γ-后球蛋白,广泛存在于各种组织的有核细胞和体液中,是一种低分子量、??性非糖化蛋白质,其血中浓度由肾小球滤过决定,而不依赖任何外来因素,如性别、年龄、饮食的影响,是一种反映肾小球滤过率变化的理想同源性标志物[2,3]。胱抑素C 能够自由通过肾小球, 并且由肾小管重吸收后降解,生理情况下几乎没有影响胱抑素C稳定的因素。胱抑素具有产生速率恒定、只能通过肾小球滤过排泄,在肾小管内完全被重吸收降解[4],这一特点使得血清胱抑素 C成为引人注目的肾脏肾小球滤过率的替代标志物[5,6],是衡量早期肾功能损害的重要指标[7-10]。最近本科室也开展了此项目,在实验过程中发现R1试剂消耗多R2试剂消耗少,随着累积检验次数的增加,这种现象更加明显,造成试剂大量浪费,本研究就是通过改变试剂实验参数使试剂R1与试剂R2消耗量相互匹配,并对改变参数前后的标本检验结果进行统计分析。
1材料与方法
1.1检测系统
奥林巴斯AU640全自动生化分析仪,某胶乳增强免疫比浊胱抑素C试剂盒。原试剂参数,R1 250 μL,R2 50 μL、吐水10 μL;改为R1 220 μL,R2 50 μL、吐水10 μL。实验所需所有试剂均在有效期内,在改变试验参数前后分别定标,质控在控。
1.2 样本收集与处理
收集2013年5月22日~6月18日在试剂线性范围内低、中、高浓度标本血清24例放置于超低温冰箱中储存备用,实验时取出室温复溶,然后对24例标本分别在改变试剂参数前后各测试一次。
1.3 实验方法
通过EXCEL2003首先对实验数据进行配对t检验;再以改变参数前数据为横坐标,改变参数后数据为纵坐标,绘制散点图,并得到回归方程与回归系数,通过统计学方法验证回归曲线与Y=X的关系。
1.4 统计学方法
计量资料以(x±s)表示,对实验数据采用EXCEL2003软件进行统计学分析,统计方法采用配对t检验和直线相关线性与回归分析,单样本均数t检验,P 0.05,差异无统计学意义。线性相关与回归分析:实验前后结果呈正相关R2=0.9966,r=0.9982接近1,回归方程Y=0.9981X-0.0364。如图1。对-0.0364(a)与0,0.9981(b)与1进行单样本均数t检验,ta=0.706330.05,无统计学意义;tb=0.1518020.05,无统计学意义。
图1 改变参数前实验数据
3讨论
首先在EXCEL2003工作表中对改变参数前后数据进行配对t检验,将实验前后数据分左右各列一列,然后选择函数TTEST,分别将两列数据代入,参数选为双尾配对t检验得到结果为P=0.08,因此实验前后结果没有统计学意义,利用TINV函数得到t值,分别将概率值(P=0.08)、自由度(d=23)输入得到结果t=1.81。然后进行线性相关与回归分析,选中两列数据点击插入选择图表选择XY散点图点击完成,散点图就会出现在工作表中,选中散点图在点击图表选择添加趋势线,选择线性,点击选项选择显示公式、显示R平方值,点击确定,就会出现图一结果,然后对Y= 0.9981X-0.0364中的系数(b)与常数(a)进行单样本均数t检验。
本研究在改变试验参数过程中减少了R1 试剂用量,从而使总反应体积变小,使抗体浓度相对增加可能出现免疫反应中的“前带现象”,主要原因可能是抗原抗体比例不合适,而产生抑制反应现象,使反应信号弱化,从而使实验结果出现严重误差。因此通过收集高、中、低浓度的胱抑素C标本,在改变实验参数前后分别检验一次,并对实验结果进行配对t检验,t=1.81,P0.05无统计学意义;以及直线相关与回归分析,通过对回归方程Y=0.9981X-0.0364与Y=X比较。分别
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