第四章微生物的营养要求培养基运输方式PPT课件.ppt

3、主动运输(Active transport) 特点：物质在主动运输的过程中 需要消耗代谢能 可以进行逆浓度运输的运输方式 需要载体蛋白参与 对被运输的物质有高度的专一性 被运输的物质在转移的过程中不发生任何化学变化 不同的微生物在主动运输过程中所需的能量的来源不同，好氧微生物中直接来自呼吸能，厌氧微生物主要来自化学能，光合微生物中则主要来自光能 。 主动运输是微生物吸收营养物质的主要方式。 主动运输模式图 细胞膜 细胞膜外 细胞膜内 恢复原构象 移位 再循环 结合 构象改变 ADP+Pi ATP Na+-K+-ATP酶系统 Na+-K+-ATPase是存在于原生质膜上的一种重要离子通道蛋白 功能: 利用ATP能量将Na+由细胞内“泵”出胞外,并将K+“泵”入胞内。 该酶由大小两个亚基组成（MW: 12万, 5.5万） 作用步骤: 1. ATP酶(E)在细胞内侧与3个Na+结合,同时消耗能量; 2. 磷酸化ATP酶(E+)构象变化将Na+排除胞外,并与2个K+ 结合; 3. K+激发E+脱磷酸化恢复为E, 同时将K+运入细胞. 基因转位是一种特殊的主动运输，与普通的主动运输相比，营养物质在运输的过程中发生了化学变化（糖在运输的过程中发生了磷酸化）。其余特点与主动运输相同。 基因转位主要存在于厌氧和兼性厌氧型细菌中，也主要是用于单（或双）糖与糖的衍生物，以及核苷与脂肪散的运输 4、基团转位(Group translocation) 在酶Ⅰ的作用下HPr被激活 在酶Ⅱ的作用下P-HPr将磷酸转移给糖 运送机制:是依靠磷酸转移酶系统,即磷酸烯醇式丙酮酸-己糖磷酸转移酶系统. 运送步骤: (1)热稳载体蛋白(HPr)的激活 细胞内高能化合物磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）的磷酸基团把HPr激活。 酶1 PEP+HPr 丙酮酸+P-HPr HPr是一种低分子量的可溶性蛋白，结合在细胞膜上，具有高能磷酸载体的作用。 (2)糖被磷酸化后运入膜内 膜外环境中的糖先与外膜表面的酶2结合，再被转运到内膜表面。这时，糖被P-HPr上的磷酸激活，并通过酶2的作用将糖-磷酸释放到细胞内。 酶2 P-HPr+糖 糖-P +HPr 酶2是一种结合于细胞膜上的蛋白，它对底物具有特异性选择作用，因此细胞膜上可诱导出一系列与底物分子相应的酶2。 基团移位模式图 细胞膜外 细胞膜内 S S S S 细胞膜 Enz2 Enz2 Enz2 Enz2 S S HPr P ~ P HPr ~ Enz1+ PEP 丙酮酸 Special Cases 1.???? Endocytosis 2.???? Exocytosis 膜泡运输 （三）物理化学条件适宜 （1）pH: 各类微生物的最适生长pH值各不相同： 细 菌：7.0~8.0 放线菌：7.5~8.5 酵母菌：3.8~6.0 霉 菌：4.0~5.8 调节方式： A．配制培养基时，用1摩尔浓度的NaoH或HCl调 B．生长过程中酸碱度的改变用缓冲剂（K2HPO4—KH2PO4） C．微生物大量产酸时，用CaCO3(不溶性)中和 D、生产中按实际需要不断向发酵液流加酸或碱液 （三）物理化学条件适宜（续） ☆磷酸缓冲液：pH值从6.0~7.6之间 K2HPO4+HCl KH2PO4+KCl KH2PO4+KOH K2HPO4+H2O ☆加入CaCO3： CO32 – HCO3 – H2CO3 CO2+H2O +H+ –H– +H+ –H– ☆培养基中所含氨基酸、肽、蛋白质等物质也可起到缓冲作用。 （2）渗透压 渗透压 等渗溶液 适宜微生物生长 高渗溶液 细胞发生质壁分离 低渗溶液 细胞吸水膨胀，直至破裂 大多数微生物适合在等渗的环境下生长，而有的菌如Staphylococcus aureus则能在3mol/L NaCl的高渗溶液中生长。能在高盐环境（2.8~6.2/L NaCl）生长的微生物常被称为嗜盐微生物（Halophiles）。 （3）氧化还原电势(redox poyential) 各种微生物对培养基的氧化还原电势的要求： 好氧微生物：+0.3~+0.4V,(在0.1V以上的环境中均能生长).厌氧微生物：只能在+0.1V以下生长 兼性厌氧