高效液相色谱在抗生素类药物分析中应用.docVIP

高效液相色谱在抗生素类药物分析中应用 　　摘要：高效液相色谱法简称HpLC，属于一种新型的分离和分析技术，它具有准确、快速、便捷以及灵敏的特点。下面本文将以综述的形式论述当前高效液相色谱在抗生素类药物分析中应用的常规方法。 　　关键词：高效液相色谱 抗生素类药物 　　前言 目前高效液相色谱法被广泛的应用于各个领域，如环境监测、食品工业、生物工程以及石油化工等方面，它主要是以液体作为流动相，并在此基础上，采用的柱色谱分离技术，一般根据其分离机机制的不同可以将其分为离子交换色谱、凝胶渗透色谱以及液固吸附色谱等。并且在检测药物的组成、成分以及控制时，也多采用该方法。 　　一、抗生素的检测 　　在上个世纪一般对于抗生素含量的测定主要是通过微生物检测法来完成的，对于相关物质的检验主要是采用薄层色谱。而在二十一世纪初，对于抗生素的检验则多借助于高效液相色谱。在2005年版中国药典中，已经记录的抗生素可达284种，其中采用高效液相色谱检验的则达到了205种，所占的比例约为总量的百分之七十左右。所包括的检测项目主要有以下几种：即测定组分、含量、含量均匀度、检查有关物质以及鉴别药物。而有关物质的检查是目前范围最大的项目。由此可见，目前随着高效液相色谱法在抗生素中使用频率的增加，也逐渐趋于成熟。当下，人们随着生活水平的提升对于药物使用的安全性与有效性也越来越关注，而在药物开发的过程中，对于药物的相关信息做到充分的了解，因此，将高效液相色谱法引入具有重要性和必要性。 　　二、高效液相色谱在抗生素类药物分析中的应用 　　目前，临床上对于抗生素的使用频率较高、种类较多，并且范围较广[1]。一般根据其化学结构的不同可以分为四环素类抗生素（主要包括了金霉素、四环素以及土霉素等）、β一内酞胺类抗生素（主要包括了头抱菌素以及青霉素等）、氟哇诺酮类抗生素（主要包括了环丙沙星以及诺氟沙星等）、氨基糖昔类抗生素（主要包括了奈替米星、庆大霉素以及新霉素等）。在对抗生素进行分析的过程中，一般存在的难点是药物的定量测定、分离以及分析。而使用的方法??包括了化学法、分光光度法以及微生物法，但是这些方法均存在专一性差以及消耗时间长的缺点。而采用高效液相色谱则能够有效的避免以上不足。RaPhaelDenooz等采用该方法对人体血浆之中的β一内酞胺类抗生素进行了测定，并以Symmetry-RC为色谱柱，以二极管阵作为检测器，并对检测的波长进行设定，分别为220、300、270以及256nm，以乙睛一磷酸盐缓冲液作为流动相，采用梯度洗脱。待抽取的血浆样品得到净化之后，对其采用高效液相色谱法进行分析，定量采用内标法。在血浆样品的回收率上可以达到93.3～107.2%。由此可见，对于血浆中β一内酞胺类抗生素的检测可以采用高效液相色谱法，将该方法用于检测使用该药物治疗患者的血浆样品，其检测结果满意。 　　在广谱抗菌素中就包括了四环素类抗生素药物，该类药物在进行药效发挥的时候，也会产生严重的毒副作用。由此可见，将高效液相色谱法用于检测四环素类抗生素药物具有必要性和重要性。熊耀华等在相关报道中指出柱前的衍生试剂采用A13+，采用该方法检测四环素类抗生素药物的新手段，并且还对四环素类抗生素（主要包括了金霉素、四环素以及土霉素等））一A13+的衍生条件进行了全面详细的探讨，经检测以上几种药物的限在70一150pg左右[2]。 　　郑和辉等人则在此基础上建立了超高效液相色谱，并且以二极管阵为检测器，对12种化妆品之中常见的磺胺抗生素（主要包括了磺胺二甲异唑、磺胺硝苯、磺胺、磺胺甲基异唑、磺胺醋酰、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺噻唑、磺胺甲基异唑、磺胺哇琳、磺胺二甲氧嘧啶以及磺胺嘧啶）进行了检测。以乙睛一0.1%的甲酸水溶液为流动相，色谱柱采用AcquityUpLeTMBEHCC18，采用梯度洗脱。对化妆品样品进行提取和反萃取之后，以UPLC一PDA进行检测，所得的结果为波长268nm。同将其与紫外光谱以及保留时间相结合，并进行综合性的定性分析以上物质在检出限上都是1ug/g，而定量下限则在2～3ug/g之间，同时峰浓度以及面积在1～25mg/L之间呈现出良好的线性关系。当磺胺硝苯的两位20.4ug的情况下，对于黄安的回收率则将达到80.1一96.9%和86.7～98.2%，在相对的标准偏差上，范围控制在10%以下。由此我们可以看出，采用高效液相色谱法进行检测，具有速度快以及分离效果好的特点，同时能够满足对磺胺抗生素的检测需求。 　　王建等人采用高效液相色谱法对盐酸头抱他美酷的含量进行了检测，其实验结果显示，该方法能够将杂质从中分离出来，使得盐酸头抱他美酷的检测结果并不受辅料、原料、分解产物以及中间体等因素的影响[3]，并且还进一步得出流动相采用乙腈-甲醇-水，会出现色谱峰