奶品微生物检验方法.doc

奶品微生物检验方法 一、菌落总数检测……………………………………………第181页 二、大肠菌群检测……………………………………………第181页 三、霉菌和酵母菌的检测……………………………………第181页 四、金黄色葡萄球菌检测……………………………………第181页 五、坂崎肠杆菌的检测………………………………………第181页 六、涂抹检测…………………………………………………第183页 七、空净检测…………………………………………………第183页 八、水样检测…………………………………………………第183页 一、菌落总数检测：同于冰淇淋微生物检验方法，见116页。 二、大肠菌群检测：同于冰淇淋微生物检验方法，见109页。 三、霉菌和酵母菌的检测：同于液体奶微生物检验方法，见135页。 四、金黄色葡萄球菌检测：同于液体奶微生物检验方法，见155页。 五、坂崎肠杆菌(E. sakazakii)的检测: 1.材料和方法 1．1设备和材料 1．1．1循环水浴箱45.5±0.2℃，管子浸没在水中，水面必须高于管子中培养基的高度。(可用水浴锅使样品充分溶解样品)。 1．1．2浸没型温度计0~50℃，0.1℃分刻度，约55cm长。 1．1．3孵育箱35~37℃ 和24~26℃。（可用培养箱） 1．1．4无菌吸管1ml、5ml、10ml，0.1ml分刻度。 1．1．5 2kg天平，灵敏度0.1g。 1．1．6接种针、3mm接种环、涂布玻璃棒。 1．1．7带放大镜的菌落计数器。 1．1．8 API20E生化试剂条。 1. 1. 9营养琼脂：蛋白胨 10.0g 牛肉膏 3.0g 氯化钠5.0g 琼脂15.0g 溶于蒸馏水中，加热溶解，121℃15分钟灭菌，至平板备用。 1．1．10肠杆菌增菌肉汤（EE肉汤）：必须用净化的牛胆粉和亮绿，以避免数量极少的受损伤的肠杆菌不生长。溶解所有的成分至1L蒸馏水，加热煮沸，分装成90ml体积。这种培养基有商品化的干粉供应（Oxoid,CM0317）,最终配制完的培养基必须是绿色的。配制好的肉汤可在2±℃的环境中保存4周。配方为：蛋白胨10.0g 葡萄糖5.0g 磷酸氢二钠8.0g 磷酸二氢钾2.0g 牛胆粉20.0g 亮绿0.015g 1.1.11氧化酶试剂 1%盐酸甲基对苯二胺水溶液α-萘酚乙醇溶液　　　　　 将配好后的盐酸甲基对苯二胺水溶液置于密塞棕色玻璃瓶中,于5～10存放。此试剂极易氧化,宜现用现配。试验时,取3718～24h的培养物1支。将两种试剂各2～3滴从斜面上端流下,2min内呈现蓝色者为细胞色素氧化酶试验阳性坂崎肠杆菌革兰氏染色(24h) - 氧化酶(24h)- V-P实验 + 枸檬酸盐(柠檬酸盐) + 鼠李糖 + 硝酸盐还原+ 溶血实验 不溶血 3.注意事项 准确吸取培养物，培养时间不易过长。 以上七项生化实验必须完全符合。 注意肠杆菌增菌肉汤（EE肉汤）的灭菌时间：115 ℃15分钟 。 六、涂抹检测：同于冰淇淋微生物检验方法，见124页。 七、空净检测：同于冰淇淋微生物检验方法，见125页。 八、水样检测：同于冰淇淋微生物检验方法，见126页。