大鼠骨骼肌卫星细胞化学损伤的保护作用.ppt

大鼠骨骼肌卫星细胞化学损伤的保护作用; 目的 研究ATP对大鼠骨骼肌卫星细胞H2O2损伤的保护作用及其对相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响，推进肌肉化学损伤保护与修复的研究。 ;方法 取新生大鼠后肢肌肉，组织块培养法进行体外培养，并通过传代培养，扩增卫星细胞，建立大鼠骨骼肌卫星细胞H2O2损伤模型。;实验分成4组：正常对照组；模型对照组（0.1 mmol/L H2O2损伤4min）；损伤保护组（剂量为10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625 mg/mL ATP溶液分别处理细胞，然后0.1mmol/L H2O2损伤4min）；增殖对照组（剂量为10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625 mg/mL ATP溶液分别处理细胞）。;并采用MTT法检测存活率，用Giemsa染色、FITC+PI+DAPI荧光凋亡检测、以及免疫细胞化学荧光抗体检测等方法研究损伤保护程度，后通过进行数据分析得出结论。;结果 大鼠骨骼肌卫星细胞经H2O2损伤后细胞存活率明显降低、凋亡率增加，ATP溶液能明显提高经H2O2损伤后细胞的存活率(P0.01)，降低凋亡率；免疫荧光抗体检测表明ATP溶液能促进Bcl-2表达(P0.01)，抑制Bax表达(P0.01)；;不同剂量ATP溶液对化学损伤的骨骼肌卫星细胞作用不同：添加适中浓度（2.5、1.25、0.625 mg/mL）ATP溶液的细胞存活率增大，浓度为1.25mg/mL ATP溶液的细胞存活率最大，;加入较高浓度和较低浓度ATP溶液的细胞存活率降低，加入较高浓度ATP溶液的细胞甚至出现明显的凋亡。 结论 ATP对H2O2损伤的大鼠骨骼肌卫星细胞具有保护作用，;其作用可能与通过JAK-STAT信号通路增强凋亡抑制基因Bcl-2的表达、抑制凋亡促进基因Bax的表达从而抑制细胞凋亡。