(全国版)2019版高考生物一轮复习 生物技术实践 第2讲 微生物的培养与应用学案.docVIP

第2讲　微生物的培养与应用 考纲要求 全国卷五年考情 1.微生物的分离和培养 2017·卷ⅠT37,2016·卷ⅠT39,2016·卷ⅢT39,2015·卷ⅠT39,2014·卷ⅠT39,2014·卷ⅡT39,2013·卷ⅡT39 2.某种微生物数量的测定 2016·卷ⅠT39,2014·卷ⅡT39 3.培养基对微生物的选择作用 2017·卷ⅠT37,2016·卷ⅢT39,2014·卷ⅠT39,2013·卷ⅡT39 考点一| 微生物的实验室培养 (对应学生用书第236页) [识记—基础梳理] 1．培养基 (1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 (2)营养构成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。 (3)①种类：按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。 ②下表为某微生物培养基的成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 H2O 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g 1 000 mL 该培养基中可以为微生物提供碳源的是葡萄糖，因为此培养基中加入了琼脂，故该培养基为固体培养基。 2．无菌技术 (1)关键：防止外来杂菌的入侵。 (2)不同对象的无菌操作方法(连线)： [答案]　①—b—Ⅰ　②—b—Ⅱ　③、④—a　⑤—a—Ⅲ、Ⅳ　⑥—b 3．大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 ―→―→―→―→ (2)纯化大肠杆菌的方法 ①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。 ②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。 ③接种方法：下图甲可表示用平板划线法接种获得的平板；下图乙可表示用稀释涂布平板法接种获得的平板。 ④纯化原理：上图甲菌体的分散是通过一系列的连续划线操作实现的；上图乙菌体的分散是通过一系列的梯度稀释和涂布平板操作实现的。 4．菌种的保藏方法 (1)临时保藏法：对于频繁使用的菌种，先接种到试管的固定斜面培养基上培养，然后放入4 ℃的冰箱中保藏。 (2)甘油管藏法：对于需要长期保存的菌种，先将菌液转入灭菌后的甘油中，混匀后放在－20 ℃冷冻箱中保存。[教材边角知识]　选修1　P18“旁栏小资料”,微生物的接种方法只有平板划线法和稀释涂布平板法吗？微生物接种的核心是什么？_________________________________________________________________ _________________________________________________________________ 【提示】　不是，微生物的接种技术还包括斜面接种、穿刺接种等方法，其核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。 [运用—考向对练] 考向1　考查无菌技术 1．牛奶中富含蛋白质，长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30 000个。以下是牛奶消毒及细菌检测实验。分析回答： (1)图中步骤①称为________消毒法。步骤②是________。 (2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供________。进行步骤③操作时，应选用下列中的哪种工具？________。为了避免杂菌污染，此步骤应在________附近进行。 (3)将接种后的培养基和作为对照的________________同时放入37 ℃恒温培养箱中，培养36小时。取出后统计各平板的菌落数，结果如下表所示。应该选择其中稀释倍数为____________的平板进行计数，经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是____________/mL。 牛奶稀释倍数 102 103 104 平板1菌落数 87 10 1 平板2菌落数 83 12 1 平板3菌落数 85 10 0 [解析]　(1)80 °C恒温水浴15 min是巴氏消毒法，步骤②是进行系列稀释(或梯度稀释)。 (2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供碳源、氮源(和维生素)，③是接种，因为需要计数，需用稀释涂布平板法，接种工具是涂布器；为了避免杂菌污染，此步骤应在酒精灯火焰附近进行。 (3)统计各平板的菌落数时，应选择菌落数在30～300的计数，经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是(87＋83＋85)÷3×102＝8 500个。 [答案]　(1)巴氏　系列稀释(或梯度稀释)　(2)碳源、氮源(和维生素)　B　酒精灯火焰　(3)一个未接种的培养基　102　8 500个 1．考虑无菌技术的效果：灭菌的效果比消毒要好。 2．考虑操作对象的承受能力：活体生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能灭菌。 　(2018·湖北省七市高三一