医药卫生霍乱等感染性腹泻实验室检测技术课件.ppt

* * 6. 肠产志贺样毒素且具有侵袭力的大肠杆菌 (ESIEC): 这是中国预防医学科学院的流行病学微生物学研究所发现的一种新的致泻性大肠杆菌 。 其主要特点是 :即产生志贺样毒素又对上皮细胞有侵袭力,与肠侵袭性大肠杆菌的 INV 探针、志贺样毒素1或志贺样毒素2的探针杂交 ,它也属于产VT毒素的大肠杆菌。 ESIEC 和0157:H7大肠杆菌的共同点都是产生志贺样毒素(VT 毒素 ),不同的地方是0157:H7 大肠杆菌的粘附性菌毛具有一定致病作用 ,而ESIEC具有侵袭力。 * * ESJEC的毒力不比O157:H7大肠杆菌差,而且在 腹泻病人大便中分离到的大肠杆菌中占的比例非常高.在北京地区占31.4%,我省占4.8%. ESJEC实验室诊断: 首先排除已知的其他感染性大肠杆菌。 取待检菌和INV,SLT1或SLT2核酸探针杂交。 * * 动物试验结果表明 : ESIEC的毒力和致病力不比 O157H7 大肠杆菌差,而且 ESIEC 在从腹泻病人大便中分离到的大肠杆菌中(己知的病原性大肠杆菌不包括在内)占的比例非常高 ,在北京地区点31.4%,在我省占 14.8% 。 ESIEC对我国人民的危害可能比前面所叙述的病原性大肠杆菌还要大,理应引起高度重视。 * * ESIEC 的实验室诊断 : （1）首先排除己知的其他感染性性大 肠杆菌。 （2 ）取待检菌和INLSLTl 或 SLT2 核酸探针杂交。 * * 志 贺 氏 菌 * * 志贺氏菌是引起人类痢疾的病原体，通常是自限性的 ,平均持续 4-7 天。本病的严重程度和病死率与宿主 、年龄和得病前的营养状况及细胞血清型别的综合因素相关。 感染宋内氏痢疾杆菌,多数病程短,除免疫抑制者外,几乎不致死。福氏痢疾杆菌的某些菌株能遗传易感倾向的人引起反应性关节病 ( 莱特尔综合征 ) 。 * * 从粪便或肛拭中检出痢疾杆菌即可作出细菌学诊断。 标本及时送到实验室处理和使用适当的选择性培养基 ( 同时采用一种弱选择性——麦康凯琼脂和一种强选择性—— CSLD 或 SS 琼 脂 ) 常可增加检出痢疾杆菌的机会。 注 意： 分离志贺氏杆菌Ⅰ型时,要特别小心，因为这种细菌在一些选择性培养基包括 SS 琼脂上会被抑制，感染病疾时,大便中常会出现脓细胞。 * * 病原体志贺菌属四个种或血清群组成 : A 群：志贺痢疾杆菌 B 群：福氏痢疾杆菌 C 群：鲍氏痢疾杆菌 D 群：宋内痢疾杆菌 A,B,C 和 D 群再分别分为 12,13,18 和血清型 和亚型 , 它们以阿拉伯数字和小写英文字母来表示 ( 例如福氏病疾杆菌 2a) 。痢疾杆菌对肠上皮细胞的侵袭力有赖于一种特定毒力质粒。人类的感染剂量很低 ( 志愿者试验显示 10-100 个细菌即可致病 ) 。 * * (一) 病原学 分类学： 志贺氏菌属是肠杆菌科艾希氏菌族中的一个属 , 与同族埃希氏菌属非常接近。志贺氏菌属发酵糖、醇类的能力较埃希氏菌属为弱。 * * 形态学 ： 本属细菌为需氧或兼性厌氧 , 营养条件要求不高，能在普通培养基上生长。 pH6.4~7.8，温度 10-40 ℃之间均能生长 , 最适温度 37℃在变通培养基上经 37 ℃培养 24 小时，菌落光滑圆形、微凸 、无色半透明，直径约 2 毫米 在液体培养基中呈均匀混浊生长。 * * 生化特性： 本菌属是无动力的革兰氏阴性杆菌 ,各群志贺氏菌属基本的生物学特性见下表－1： * * (二) 采样 1 、以新鲜粘液血便为主( 亦可采用肛拭子取 )。最好在服药前采便 ,取便后应及时送检验室接种培养，否则应将粪便标本或肛拭子放入带有保存液的管内，或置 Cary-Blair 运送培养基内，送检验室培养或放置 4-10 ℃冰箱暂存，在收到送检标本后，应即刻接种培养。 * * 2、如为慢性痢疾患者或带菌者粪便、食品等标本 ,可先置有保存液或运送培养基内 ,取标本接种于 GN 肉汤/GN 肉汤接种物。在室温 25 ℃时即有增菌作用 ,在炎热季切 ,GN 肉汤均应冷藏送检 ,接种量不能超出l :10。增菌时间不能超过 6 小时。 3、其他标本：如水或污水等,按有关规定进行。 * * (三) 检验程序 （见表-2） * * （四）、检验方法 1、 增菌：如系慢性痢疾患者,带菌者的粪便或食品、水等标本含菌量少者，