生化介绍.docVIP

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生化介绍

一、生化分析仪的用途 生化分析仪是临床诊断常用的重要仪器之一,它是通过对血液和其他体液的分析来测定各种生化指标,如胆固醇、肌酐、转氨酶、葡萄糖、无机磷、淀粉酶、白蛋白、总蛋白、钙等。结合其他临床资料,进行综合分析,可帮助诊断疾病,对器官功能作出评价,并可鉴别并发因子以及决定今后治疗的基准等,又称为“诊断生化”,主要运用了光谱技术中的吸收光谱法和比浊法(详见“原理与结构”)。 该仪器是医院检验科最主要的仪器,检验科的工作大致可分为生化、微生物与免疫、临床检验、血液学等几方面,其中生化项目占总工作量的50~60%甚至以上,。具体说生化检验包括检测血、尿、脑脊液、胸腹水等中的各种酶活性、化学成份、浓度、电解质浓度等,国内市场较高级的售价可达100-200多万人民币。 血液生化分析的常规项目包括: 血糖(GLU) 尿素氮(BUN) 尿酸(UA) 总蛋白(TP) 白蛋白(ALB) 甘油三酯(TRIG) 胆固醇(CHOL) 高密度脂蛋白(HDL) α—淀粉酶(α—Amy) 硷性磷酸酶(AKP) 直接胆红素(D—Bili) 总胆红素(T—Bili) 肌酸酐(CK) 钙(Ca) 氯(Cl) 磷(P) 铁(IRON) 谷丙转氨酶(ALT/GPT) 谷草转氨酶(AST/GOT) 乳酸脱氢酶(LDH) γ—谷氨酰转肽酶(γ—GT) 肌酸激酶(CK) 肌酸激酶同功酶(CK-MB) 羟丁酸脱氢酶(HBDH) CO2 胆碱酯酶(Cholinesterase) 进行这些检测如用手工方法,则有速度慢、费人工、费试剂、准确性差、质量控制困难等问题。近几十年来,随着医学科学的发展,各种自动生化分析仪器和试剂均得到很大发展,生化分析由手工操作进入机械化、自动化阶段,并朝着“自动、快速、正确、微量”方向发展。自动生化分析仪的特点是精度高、重复好、功能齐全、可进行吸光度、浓度和酶活力的测定,能使用终点法、动力学法、初速度法和双波长法进行分析。因此自动生化分析仪在临床检验中获得系统的应用,发达国家生化检测的自动化程度已相当高。 生化仪检测项目多,每个项目最低收费2.5元/项,有的项目如血氨收费达60元/项。根据所用试剂盒成本、方法、复杂程度、工作量大小而不同,试剂成本都只占收费的1/6以下。所以医院购机后只要有足够的病例,收回成本的时间一般都不超过一年,经济效益相当可观。 二、原理、结构与仪器分类方法 (一)、吸收光谱法 (1)、光谱范围 波长从200nm-400nm的电磁辐射,称为紫外光,波长从400nm-760nm的电磁辐射,称为可见光。 (2)、吸收曲线 以波长(λ)为横坐标,以吸光度为纵坐标而绘制出的一条曲线称为吸收曲线。 在一段波长范围内,有最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin,在最大吸收波长处测定可获得最大的测定灵敏度。 (3)、吸光度的定义 一束强度为Io的平行单色光通过一个含有浓度为C的吸光物质、厚度为L的吸收池时,如上图,一些光子被吸收,光强从Io衰减为It,则该溶液的吸光度A等于: 其中为透光率。 (4)、Lamber-Beer(朗伯—比尔)定律: 其中为摩尔吸光系数,摩尔吸光系数的意义为1摩尔浓度的溶液在厚度为1cm时的吸光度,C为溶液的浓度;L为吸收池的厚度(单位为cm,亦称光径)。 Lamber-Beer定律的意义为:某溶液的吸光度等于该物质的吸光系数、浓度C和光径L(cm)的乘积,当光径不变时,浓度和吸光度成正比,这是生化分析仪利用吸收光谱法进行定量测定的基础,见下图: 生化检验就是使待测物质与特定的试剂在一定条件下反应,产生特定的吸光物质,再对吸光物质的吸光度或吸光度变化进行检测,通过一定的计算得到待测物质浓度或活性。 Lamber-Beer定律成立的前提条件是:(1)被吸收光为单色平行光,(2)待测定溶液为稀溶液。 除特种蛋白外的大部分临床生化项目,配以相应的试剂,均可利用吸收光谱法在生化分析仪上进行测定。 (二)、比浊法 (1)、分类: 比浊法分两类:透射比浊法和散射比浊法。 带有小粒的悬浮液和胶体溶液都具有向四面八方散射入射光的性质,当一束平行光通过含有悬浮质点的悬浮液或胶体溶液时,同时受到散射和吸收两个因素的影响,使光的强度减弱。在光源的光路方向上测量透射光(实际上还包括散射光)强度与入射光强度比值,并通过该比值测定出悬浮液或胶体溶液中质点的溶度,称为透射比浊法,在光路的其他方向上测定测量散射光强度,从而测定出悬浮液或胶体溶液中质点的溶度,称为散射比浊法。 (2)、测定原理: 透射比浊法 一束强度为Io的平行单色光通过一个含有悬浮质点(颗粒大小与光源波长接近)的悬浮液或胶体溶液时,如上图,其透射光强度I与Lamber-B

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