小鼠的采血.pptVIP

小鼠的采血 小 鼠 最大安全采血量(0.2 mL) 最小致死采血量(0.3 mL)  取少量血：尾静脉采血，断尾采血，眼底静脉丛采血(做血样的检测) 取中量血：心脏取血，断头取血 取大量血：摘眼球取血　　　　　　　　　　　　　　　 1.剪尾采血 当所需血量很少时采用本法。温水浸泡，消毒，用锐器（刀或剪刀）割去尾尖0.3-0.5cm，也可在尾部作一横切口，割破尾动脉或静脉，收集血液。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1mL。 2.眼眶静脉丛采血 左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血，右手持毛细玻璃管，与鼠面成45度的夹角，由眼内角刺入，斜面刺向眼球，刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界，刺入深度，小鼠约2～3mm，当感到有阻力时即停止推进，同时，将针退出约0.1-0.5mm，边退边抽，若穿刺适当血液能自然流入毛细管中。 3.摘眼球采血 4、断头取血 采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大（小）鼠的颈部皮肤，并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈，约1/2-4/5的颈部前剪断，让血自由滴入盛器。小鼠可采血约0.8～1.2mL。 5.心脏采血 鼠类的心脏较小，且心率较快，心脏采血比较困难，故少用。若做开胸一次死亡采血，先将动物作深麻醉，打开胸腔，暴露心脏，用针头刺入右心室，吸取血液。小鼠约0.5-0.6mL。 6.颈动（静）脉采血 先将动物仰位固定，切开颈部皮肤，分离皮下结缔组织，使颈静脉充分暴露，可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉，离心端结扎，向心端剪口将血滴入试管内。  7.腹主动脉采血 最好先将动物麻醉，仰卧固定在手术架上，从腹正中线皮肤切开腹腔，使腹主动脉清楚暴露。用注射器吸出血液，防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织，夹住动脉近心端，用尖头手术剪刀，剪断动脉，使血液喷入盛器。  8.股动（静）脉采血 先由助手握住动物，采血者左手拉直动物下肢，使静脉充盈。或者以搏动为指标，右手用注射器刺入血管。体重15-20g 小鼠采血约0.2-0.8mL。 血液包含有四种成分：血浆，红细胞，白细胞，血小板。 血浆约占血液的55%，是水，糖，脂肪，蛋白质，钾盐和钙盐的混合物。 血细胞和血小板组成血液的另外45%。 血浆的主要作用是运载血细胞，运输维持人体生命活动所需的物质和体内产生的废物等。血浆相当于结缔组织的细胞间质。是血液的重要组成分，呈淡黄色液体（因含有胆红素）。 离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞成分的液体，即血浆。 血浆的化学成分中，水分占90～92％，溶质以血浆蛋白为主。血浆蛋白是多种蛋白质的总称，用盐析法可将其分为白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原三类。 血清是指不加抗凝剂的全血经过静置一段时间,血细胞沉降后的上层液体,不含凝血酶原和纤维蛋白原, 但含有少量血液凝固时由血管内皮细胞和血小板释放出来的化学物质，血清不可以再凝。血清含有糖类,无机盐及抗体等. 二、尸体、废弃物的处理 1、受试动物尚未死亡，应采用安乐死处理。 2、动物尸体与废弃物处理： 实验废弃物：分类收集，无害处理。 无毒性受试验物或无重大疫病的动物尸体，集中收集放入尸体袋冷冻，待焚烧处理。 有毒性受试验物的动物尸体，应做毒性消除或中和处理。 重大疫病的动物尸体，应该在达到相应生物安全的灭菌消毒器中进行消毒处理后，再冷冻保存焚烧处理。 三、实验内容 取免疫后的小鼠，用酒精棉球擦拭小鼠面部（确保小鼠的毛是湿的，以避免其掉入容器引起溶血）；乙醚麻醉（注意：不要过度麻醉致小鼠死亡） 用手术剪刀或者镊子迅速摘下小鼠的眼睛，同时用离心管接取血液，约1mL左右； 将血室温放置30min，凝固; 2,000 rpm离心10min; 吸取血清,置1.5mL离心管，做好标记，-5 ℃冰箱保存。 * * 一、常用的小鼠采血方法 * *