浅谈紫穗槐4种提取液对大皱鳃金龟子活性分析.docVIP

浅谈紫穗槐4种提取液对大皱鳃金龟子活性分析 　　摘要：以甲醇、乙醇、氯仿和蒸馏水为溶剂获得的4种紫穗槐提取液，对沙地害虫大皱鳃金龟子进行了活性测定。结果表明：乙醇提取液（100mg/mL）对大皱鳃金龟子毒杀活性最强，氯仿提取液次之，蒸馏水和甲醇提取液在4种提取液中活性最差；紫穗槐4种溶剂提取液对大皱鳃金龟子均有一定的触杀作用，但是活性均不高。 　　关键词：紫穗槐；触杀活性；活性测定；大皱鳃金龟子 　　中图分类号：S155.58文献标识码：B文章编号：1674-9944（2013）10-0025-02 　　1引言 　　紫穗槐（Amorpha fruticosa（L）），是豆科紫穗槐属的多年生小灌木，原产于北美，自20世纪30 年代传入我国，因其易种植、抗逆性强，而且有防风固沙、保持水土等功能，被广泛种植于西北沙漠地区。国内外学者对紫穗槐进行了大量的研究，已发现它的根、干、皮、叶及果实均能产生和释放一种抑菌及毒杀昆虫的次生代谢物质[1，2]。 　　大皱鳃金龟子（Trematodes grandis），为鞘翅目鳃金龟科，是西北地区樟子松、长柄扁桃防护林的主要食叶害虫[3]，广泛分布于毛乌素沙漠。大皱鳃金龟子以成虫危害幼林，尤其是纯人工林危害更为严重，成片树叶、嫰芽被吃光，使防护林毁于一旦，环境更加恶化。本实验以紫穗槐为材料，利用4种溶剂提取生物活性成分，以大皱鳃金龟子为试虫，进行生物活性研究，为营造紫穗槐混交林防治这一沙地害虫提供新思路。 　　2材料和方法 　　2.1实验材料 　　以紫穗槐鲜叶作为实验材料，花期采样，试虫采自毛乌素沙地公草湾林场，挑取健康一致的成虫供试。 　　2.2有效成分的提取 　　将采集的紫穗槐叶洗净，放在40℃恒温箱进行干燥处理。干燥完成后，将其用粉碎机粉碎成细粉末状。用分析天平秤取紫穗槐叶片粉碎物约各100g，共4份，分别加甲醇、乙醇、氯仿、蒸馏水，在室温条件下密封浸提24h，期间振荡5次，使其充分浸提，然后过滤，浸提重复两次，合并滤液，45℃减压浓缩至水相，蒸馏水定容至200mL，即浓度为100mg/mL，放4℃冰箱中备用。 　　2.3生物活性的测定 　　（1）毒力作用测定。将从野外采集的樟子松芽浸入药液约1min后迅速取出，晾干后??入垫有滤纸的直径9cm烧杯中，每个烧杯内置10个松芽。取已饥饿处理48h的试虫按随机区组法布置试验，每个烧杯内接入试虫10只，每组处理100只幼虫，每天定时检查试虫生长情况，记录死亡数量，连续统计7d，并计算校正死亡率。 　　（2）触杀作用测定。采用虫体浸渍法，挑选大小一致的成虫，放入浸虫器皿中，在药液中浸3～4s，取出后用吸水纸吸去多余药液，然后放入铺有滤纸保湿的直径为9cm的烧杯中，饲喂新鲜樟子松嫩芽，每个处理100头试虫，重复3次，对照用蒸馏水处理，处理后试虫置于光照培养箱，保持温度25±1℃、湿度75%～80%、光照L∶D=14∶10，培养24、48h后记录死亡数，计算死亡率。 　　3结果与分析 　　3.1紫穗槐提取液对大皱鳃金龟子的毒力作用 　　紫穗槐提取液对大皱鳃金龟子72h内的毒力测定结果表明，不同溶剂提取液对大皱鳃金龟子都有一定的致死率。从表1可知，紫穗槐乙醇提取液大皱鳃金龟子的杀虫效率明显高于其他溶剂，在72h的校正死亡率达92%，氯仿提取液次之，蒸馏水与甲醇提取液毒杀效率最低。 　　3.2紫穗槐提取液对大皱鳃金龟子的触杀活性分析 　　紫穗槐的4种溶剂提取液对大皱鳃金龟子的触杀作用如表2所示，4种提取液均对大皱鳃金龟子有一定的触杀活性，但是总体来看活性不高。乙醇提取液对大皱鳃金龟子触杀活性相对较高，浓度为100mg/mL时，对大皱鳃金龟子的触杀率为51%；氯仿提取液的触杀活性次之，仅41%；蒸馏水和甲醇提取液对大皱鳃金龟子的触杀活性最低。 　　4结语 　　植物在长期自然演变中进化出一套适应周围环境的化学机制，不仅可以与邻近植物竞争资源，扩大生存空间，还要对付各种昆虫、细菌、真菌和病毒等，作为紫穗槐化学防御系统的组成部分，灰叶酚、灰叶素、鱼藤素、鱼藤酮等次生代谢产物起重要作用。这些化学物质，本身杀虫活性较弱，只有按一定比例配比，即能表现明显的协同增效作用，而在不同的溶剂中其毒力也明显不同[5，6]。 　　本文通过4种溶剂（甲醇、乙醇、氯仿、蒸馏水）获得紫穗槐的提取液（浓度100mg/mL），并对其进行毒力测定分析，结果表明：紫穗槐4种溶剂提取液对大皱鳃金龟子均有不同程度的毒杀作用，以乙醇提取液效果最强，氯仿提取液次之，甲醇蒸馏水提取液最差。紫穗槐不同溶剂提取液对大皱鳃金龟子触杀作用活性都不高，表明紫穗槐次生代谢物质不适合开发触杀药剂；紫穗槐乙醇提取液对大皱鳃金龟子表现出很强的生物活性，因此，可以对其进行下一步的研究