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酶反应条件的选择

实验安排 D1:(一)蛋白质的性质、(二)酶反应条件的选择 D2:(三)蛋白质含量的测定、(四)氨基酸的层析 D3:(五)蛋白质的电泳(醋酸纤维素薄膜)、(六)血糖测定 D4:(七)真核细胞中核酸的分离 D5:(八)重组DNA基本方法(1) D6: (八)重组DNA基本方法(2) D7:考试 实验须知 (一)实验前准备 预习 (二)实验时注意事项 1、严肃认真、注重培养良好的实验习惯与实验技能 2、仔细观察、客观记录 3、严格遵守操作规程 4、公用物品及时放回 5、爱护仪器设备、保持清洁卫生 实验须知 (三)实验后注意事项 1、清洗、整理仪器设备 2、整理台面、打扫卫生 实验须知 (四)实验报告 1、A4纸 2、第二天交给上次任课的教员 3、真实客观、独立完成 4、内容安排 目的要求、原理(简述)、方法(步骤)、结果、讨论分析 实验须知 (五)实验纪律 1、实验时不得做其它与实验无关的事 2、不得打闹嬉戏 3、不得无故缺席 4、不得交头接耳 实验须知 (六)实验安全 1、基本要求 实验前认真准备、实验时仔细操作,实验后清洁整理 2、用水用电 3、贵重设备 4、化学试剂的使用(强酸、强碱、有毒有害、易燃易爆) 酶 反 应 条 件 的 选 择 生物化学与分子生物学教研室 陈 健 一、温度对酶的影响 目的和要求: 1. 通过检验不同温度下脲酶的活性,了解温度对酶活性的影响。 2. 了解电热恒温水浴的使用。 原 理 温度 CO(NH)2 + H2O CO2 + 2NH3 温度对酶的影响 操作步骤 1. 取3支粗细相近的干燥试管,编号后按下表的顺序准确地加入各种试剂,混合均匀。 试管 0.1%尿素液 预温 尿素酶液 温度 时间(min) 纳氏试剂 1 20滴 冰水 10滴 冰水 10~15 冷 10滴 2 20滴 50~60℃ 10滴 50~60℃ 10~15 10滴 3 20滴 100℃ 10滴 100℃ 10~15 却 10滴 观察并分析结果。 二、酸碱度对酶的影响 目的和要求: 了解pH对酶活性的影响。 酸碱度对酶的影响 操作步骤 1. 取4支粗细相近的干燥试管,编号后按下表的顺序准确地加入各种试剂,混合均匀。 试管 0.1% 0.5M 1M 尿素 蒸馏水 保温 纳氏 尿素液 H2SO4 NaOH 酶液 条件 试剂 1 20滴 1滴 - 10滴 - 50~60℃ 冷 10滴 2 20滴 - - 10滴 1滴 保 10滴 3 20滴 - 1滴 10滴 - 温 10滴 4 20滴 1滴 1滴 - 9滴 10~15min 却 10滴 观察并分析结果。 三、抑制剂和激活剂对酶的影响 目的和要求: 1. 了解酶反应的激活和抑制。

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