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不同产地岗梅根茎中酮甾醇3―O―β―D葡萄糖苷含量测定 　　摘要：目的 建立岗梅根、茎中?酮甾醇3-O-β-D葡萄糖苷的含量测定方法，比较不同产地岗梅根、茎中?酮甾醇3-O-β-D葡萄糖苷的含量。方法 采用高效液相色谱法。色谱柱为Kromasil C18柱（4.6 mm×250 mm，5 ?m），流动相为甲醇-水（95∶5），流速为1.0 mL/min，柱温25 ℃。蒸发光散射检测器参数：漂移管温度为90 ℃，氮气流速为1 L/min。结果 ?酮甾醇3-O-β-D葡萄糖苷在0.250～3.992 ?g范围内呈良好的线性关系（r=0.999 5），平均回收率为98.2%，RSD=2.0%（n=6）。岗梅根中含量在0.114～0.303 mg/g之间，岗梅茎中含量在0.061～0.224 mg/g之间。结论 本方法简单快捷、准确可靠，可用于岗梅药材的质量控制。岗梅根中?酮甾醇3-O-β-D葡萄糖苷含量比岗梅茎高。 　　关键词：岗梅；?酮甾醇3-O-β-D葡萄糖苷；含量测定；高效液相色谱-蒸发光散射检测器 　　DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.05.020 　　中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）05-0058-02 　　岗梅主要分布在我国广东、广西等地，其性寒味苦，有清热解毒、生津止渴、利咽消肿、散瘀止痛之功效，主要有效成分为三萜皂苷类化合物[1]。岗梅传统入药部位为冬青科植物梅叶冬青Ilex asprella（Hook.et Arn.）Champ.ex Benth.的干燥根，但由于资源日渐缺乏，今已根茎合用。然而根、茎中总皂苷含量差异较大[2]，为了进一步比较其差异，本试验采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法（HPLC-ELSD）建立了岗梅药材中的一种三萜皂苷――?酮甾醇3-O-β-D葡萄糖苷[3]的含量测定方法，测定并比较不同产地岗梅根、茎中的含量。 　　1 仪器与试药 　　岛津LC-20A高效液相色谱仪（自动进样器：岛津SIL-20A；泵：岛津LC-20AT；柱温箱：岛津CTO-10AS VP；蒸发光散射 　　基金项目：广东省教育部产学研结合项目（2011B090400191） 　　通讯作者：陈丰连，E-mail：chenfenglian@21 　　检测器：Alltech 3300 ELSD；处理软件：岛津LC Solution）， MODEL HN1006超声清洗器（中国华南超声设备厂），Sartious BP211D分析天平。 　　?酮甾醇3-O-β-D葡萄糖苷对照品（自制，纯度98%），甲醇，水。超纯氮气购于广州市粤港工业气体有限公司。岗梅药材采于广东平远GAP基地、从化、化州等地，经广州中医药大学中药鉴定教研室童家?老师鉴定为冬青科植物梅叶冬青Ilex asprella（Hook.et Arn.）Champ.ex Benth.的干燥根和茎。 　　2 方法与结果 　　2.1 对照品溶液的制备 　　取?酮甾醇3-O-β-D葡萄糖苷对照品适量，精密称定，置容量瓶中，加入甲醇，制成含?酮甾醇3-O-β-D葡萄糖苷0.998 mg/mL的对照品溶液。 　　2.2 供试品溶液的制备 　　取过60目筛岗梅5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇100 mL，称定质量，超声处理（功率300 W，频率50 kHz） 30 min，取出，放冷，用甲醇补足减失的质量，移取50 mL，回收甲醇，浓缩后加甲醇定容至5 mL，过0.45 ?m微孔滤膜，作为供试品溶液。 　　2.3 色谱条件与系统适用性试验 　　Kromasil C18柱（4.6 mm×250 mm，5 ?m），流动相为甲醇-水（95∶5），流速1.0 mL/min，柱温25 ℃。蒸发光散射检测器参数：漂移管温度90 ℃，氮气流速1 L/min，增益4。进样量：20 ?L。?酮甾醇3-O-β-D葡萄糖苷与其他峰分离度大于1.5。理论塔板数按?酮甾醇3-O-β-D葡萄糖苷计应不少于10 000。色谱图见图1。 　　2.4 精密度试验 　　精密移取0.998 mg/mL?酮甾醇3-O-β-D葡萄糖苷对照品溶液0.5 mL至10 mL量瓶，加甲醇稀释至刻度，连续进样5次，记录峰面积， RSD=0.9%。结果表明仪器精密度良好。 　　2.5 线性关系考察 　　精密移取0.998 mg/mL?酮甾醇3-O-β-D葡萄糖苷对照品溶液0.5、1.0、2.0 mL于10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，得0.049 9、0.099 8、0.199 6 mg/mL溶液，精密移取0.049 9 mg/mL溶液2.5、5 mL，分别置于10 mL量瓶，加甲醇至刻度，得0.02