山药种质资源遗传多样性的研究-蔬菜学专业论文.docxVIP

目录1引言 11.1山药种质资源概述 11.1.1山药的种类及其分布 11.1.2我国山药的栽培种类及生物学特性 21.1.3山药种质资源的鉴别 31.2形态学水平研究现状 41.2.1形态学研究方法 41.2.2山药形态学研究进展 41.3细胞学水平研究现状 51.3.1细胞学研究方法 51.3.2山药细胞学研究进展 51.4 DNA 分子水平研究现状71.4.1DNA 分子水平研究方法71.4.2山药 DNA 分子水平研究进展81.4.3ISSR 分子标记技术91.5本研究的目的意义 102材料与方法 112.1山药形态指标调查 112.1.1实验材料 112.1.2山药种植及田间管理 112.1.3主要形态指标观察 122.1.4性状编码及统计分析 122.2山药染色体压片的制作 132.2.1实验材料 132.2.2实验器材与试剂 132.2.3实验试剂配制 132.2.4山药染色体的制作 142.3山药 DNA 提取及 ISSR 分子标记142.3.1实验材料 142.3.2实验设备与试剂 142.3.3山药基因组 DNA 的提取162.3.4ISSR 分子标记163结果与分析 173.1山药形态指标观察结果及 R 型聚类分析173.1.1主要形态性状指标分析 173.1.2R 型聚类分析203.2山药染色体制作的分析 223.2.1山药染色体初步分析 223.2.2山药染色体制作优化的效果分析 223.2.3山药材料的染色体制作效果分析及形态观察 243.2.4山药根尖染色体数目的确定 253.3 ISSR-PCR 结果分析293.3.1ISSR 扩增结果293.3.2品种鉴别 313.3.3相异系数及聚类分析 314讨论 364.1形态标记和 R 型聚类分析364.2山药的染色体制作及形态数目观察 374.3 ISSR-PCR 分子标记384.4本研究的成果和存在的不足 395结论 40致谢 41参考文献 42作者简介 481 引言1.1 山药种质资源概述1.1.1 山药的种类及其分布山药(Dioscorea)为百合目(Liliales)、薯蓣科（Dioscoreaceae）、薯蓣属（Dioscorea） 中一年生或多年生缠绕性草质藤本植物[1-3]，别名薯蓣，怀山药等，能形成肥大的地 下块茎，其肉质细腻，风味鲜美，供人们食用或药用[4]。李时珍在《本草纲目》中 将其功用概括为“益肾气，健脾胃，止泄痢，化痰涎，润皮毛”5 个主要方面[5]。山 药产量很高，又含有丰富的碳水化合物和蛋白质，营养成分全面，以山药干品计算 和谷物比较也毫不逊色，因而又是国际性的重要粮食作物[6]。1998 年全球山药产量 就达 3.0×107t[7]。一些热带国家以山药为主食。西非及尼日利亚产量最多，约占世界 总产量的 1/2；中国除西藏、东北及西北黄土高原外，其他各省均有栽培[8]。目前，国际上对山药的研究机构主要有以下几个：IITA（International Institute of Tropical Agriculture），总部位于尼日利亚；CGIAR(Consultative Group on InternationalAgricultural Research)，总部位于美国；CIRAD(Centre de Cooperation International en Recherche Agronomique pour le Developpement)，总部位于法国；CTCRI(Central Tuber Crops Research Institute)，总部位于印度。IITA 和 CGIAR 致力于山药方面进行合作，主要目标有 3 点：(1)增加山药产量；(2)降低山药生产者和消费者的风险；(3)提高山药价格并扩大市场[9]。这些国际机构研究的山药是薯蓣科中的所有物种，而并不 仅仅是植物学分类上的山药种。薯蓣科约 6 属，650 种，其中许多是有毒的，广布 于热带和亚热带地区[10]。我国仅 1 属，约 49 种，主要分布于长江以南各省区。但是 目 前 全 球 薯 蓣 科 中 主 要 的 栽 培 种 有 大薯 (D.alata) ， 黄独 (D.bulbifera) ， 黄山药 (D.cayenensis)，甘薯(D.esculenta)，薯蓣 (D.opposita)，日本薯蓣(D.japonica)，光叶 薯蓣(D.nummularia)，五叶薯蓣(D.pentaphylla)，圆山药(D.rotundata)和三裂叶山药 (D.trifida)[11]。D.rotundata 和 D.cayenensis 是西非本土两个特别重要的栽