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南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他 人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证 书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明 确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名：年月日南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读（博/硕）士学位期间在导师指导下完 成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得以其它 单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有 权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部 分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省 有关部门规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕士学位论文全文 数据库》，并按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。 同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据 库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文，解密后适用该授 权。作者签名：导师签名：年月日年月日目录（contents）一 主要缩略语英文索引 …………………………………………………1 二 中文摘要 ………………………………………………………………2 三 英文摘要 ………………………………………………………………3 四 论文正文1. 前言 …………………………………………………………………42．实验材料 ……………………………………………………………63．实验方法……………………………………………………………104．实验结果……………………………………………………………155．讨论…………………………………………………………………286．结论…………………………………………………………………31 五 参考文献………………………………………………………………32 六 综述……………………………………………………………………36 七 硕士期间撰写的文章…………………………………………………44 八 致谢……………………………………………………………………45主要英文缩略语索引（Abbreviations）英文缩写英文全名中译名cDNAcomplement DNA互补脱氧核糖核酸PMSFPhenylmethylsulfonyl fluoride苯甲基磺酰氟PAGEpolyacrylamide gel electrophoresis聚丙烯酰胺凝胶泳DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜DEPCdiethyl pyrocarbonate焦碳酸二乙酯RTreverse transctiption逆转录PCRpolymerase chain reaction聚合酶链式反应EBethidium bromide溴化乙啶SDSsodium dodecyl sulfate十二烷基硫酸钠PVDFpolyvinylidene difluoride聚偏二氟乙烯EDTAethylenediamine tetraacetic acid四乙酸乙二胺PI3Kphosphatidylinositol-3-kinase磷脂酰肌醇-3-激酶Aktprotein kinase B蛋白激酶 BmTORmammalian target of rapamycin钠巴霉素的哺乳动物靶子p70S6KRibosomal Protein S6 Kinases,70kD核糖体蛋白质 S6 激酶M-CSFMacrophage colony-stimulating factor巨噬细胞集落刺激因子G418Geneticin新霉素类抗生素PBSphosophate buffered saline磷酸盐缓冲液rpmrevolutions per minute每分钟转数HRPhorseradish peroxidase辣根过氧化物酶KDakilodalton千道尔顿ODoptical density光密度ddH2Odouble distillated H2O双蒸水WBwestern blotting analysis蛋白质免疫印迹检测技术M-CSF 激活人乳腺癌 MCF-7 细胞 PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信号通路硕 士 研 究 生：刘鑫指导教师：唐圣松教授专业名称：药理学中 文 摘 要目的：探讨胞质 M-CSF 对 PI3K/Akt/mTOR/p70S6K 信号通路的影响。方法：常规培养转染 M-CSF 的 MCF-7 细胞（命名为 MCF-7-M 细胞）、转染 空载