胞质m-csf通过抑制hif-1αbnip3bax信号通路增强乳腺癌mcf-7细胞的凋亡抗性-cytoplasmic m - csf enhances apoptosis resistance of breast cancer mcf - 7 cells by inhibiting hif - 1α bnip 3 bax signaling pathway.docx

论文题目：胞质 M-CSF 通过抑制 HIF-1α/BNIP3/Bax信号通路增强乳腺癌 MCF-7 细胞的凋亡抗性论文作者签名: 指导教师签名: 论 文 评 阅 人 1 ：评阅人 2： 评阅人 3：答辩委员会主席：委员 1： 委员 2： 委员 3： 委员 4： 委员 5： 委员 6：答辩日期： 2015 年 5 月 23日I南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含 其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学 位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文 中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名：年月日南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读（博/硕）士学位期间在导师指导下完成 的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得以其它 单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校 有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部 或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或 湖南省有关部门规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕士学位 论文全文数据库》，并按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》规定 享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学 位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论 文，解密后适用该授权。作者签名：年月日导师签名：年月日II中英文缩略语索引英文缩写英文全称中译名M-CSFmacrophage colony-stimulating factor巨噬细胞集落刺激因子HIF-1αhypoxia-inducible factor 1α低氧诱导因子 1αBNIP3BCL2 and adenovirus E1B19 kDa interacting protein 3BCL2 和腺病毒E1B19kDa 相互作用蛋 3BCL-2B cell lymphoma/lewkmia-2B 细胞淋巴瘤/白血病-2BAXBcl-2 Associated X ProteinBcl-2 相关 X 蛋白ADMadriamycin阿霉素BSA ANOVACaspase3bovine serum albumin analysis of variancecysteinyl aspartate specific proteinase3牛血清白蛋白方差分析 含半胱氨酸的天冬氨酸 蛋白水解酶 3Caspase9cysteinyl aspartate specific proteinase9含半胱氨酸的天冬氨酸MDM2murine double minute 2蛋白水解酶 9E3 遍在蛋白连接酶G418Geneticin新霉素衍生物PBSPhosphate balanced solution磷酸盐缓冲液EDTAethylenediamine tetraacetic acid四乙酸乙二胺ODOpical density光密度PAGEpolyacrylamide gel electrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳PMSFPhenylmethanesulfonyl fluoride苯甲基磺酰氟PVDFPolyvinylidene fluoride聚偏氟乙烯TAMstumor-associated macrophages肿瘤相关巨噬细胞IPImmunoprecipitation免疫沉淀反应HRE2hypoxia response element 2低氧反应元件I胞质 M-CSF 通过抑制 HIF-1α/BNIP3/Bax 信号通路增强乳腺癌 MCF-7 细胞的凋亡抗性摘要:目的：探讨巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）对人乳腺癌 MCF-7细胞 HIF-1α/BNIP3/Bax 信号通路的影响和意义。方法：用含 10％NBCS(新生牛血清)的 1640 培养基分别培养 MCF-7-M 细胞（胞质稳定转染 M-CSF 的 MCF-7 细胞），MCF-7-C 细 胞（稳定转染空载体的 MCF-7 细胞），亲本 MCF-7 细胞。 蛋白印迹 检测 M-CSF 对 ADM 处理前后 MCF-7 细胞 HIF-1α、BNIP3、Bax、 Caspase 3 和 Caspase 9 蛋白的影响；免疫共沉淀检测 M-CSF 对 ADM 处理前后 MCF-7 细胞 Bcl-2 与 BNIP3 和 Bax 相互作用的影响； Hoechst33342 染色法、流式细胞术检测胞质 M-CS