药物定量分析与分析方法验证ppt课件.pptVIP

第四章  药物定量分析与分析方法的验证; 第一节 样品的前处理方法 哪些药品需要前处理 何为不经有机破坏处理 何为有机破坏处理 生物样品前处理;一、需要前处理的样品 含金属药物：富马酸亚铁、葡萄糖酸锑钠、枸橼酸铋钾、葡萄糖酸锌、酒石酸锑钾等。 含卤素药物：泛影酸、三氯叔丁醇、碘番酸、磺溴酞钠等。 生物样品：血样、尿液、唾液、头发等;二、不经有机破坏处理的分析方法 直接测定法 ; 适用于金属原子或卤素与碳原子结合牢固的有机金属药物。;1. 湿法破坏 （1）硝酸-高氯酸法 （2）硝酸-硫酸法 （3）硫酸-硫酸盐法 （4）其它湿法;注意： 湿法破坏的仪器一般为凯氏烧瓶； 试剂应不含被测离子或干扰测定的成分； 由于矿酸量数倍于样品，须做空白实验校正； 操作须在通风橱内进行。;2. 高温炽灼法;3. 氧瓶燃烧法（Oxygen flask combustion method） ; 仪器装置 ;称样 燃烧分解操作（通O2 1-2 min，燃烧） 吸收液 水-NaOH（含碘、溴、氯药物） 例盐酸胺碘酮、碘苯酯、甲状腺粉 水- H2O2（含硫药物） 例磺溴酞钠 水（含氟药物） 硝酸溶液（含硒药物）;四、生物样品分析前处理技术 一般考虑 根据生物样品种类 血---除蛋白质 尿---缀合物水解 唾液---除去粘蛋白; 根据测定方法 免疫分析——灵敏、专属——前处理要求简单 光谱分析——灵敏、选择性差——前处理要求高 色谱分析——准确、精密，专属———除蛋白质;去除蛋白质 目的： 使药物从结合状态下释放出来 减少提取过程中的乳化 消除干扰，保护色谱柱 常用去蛋白方法： 加入与水相混溶的有机溶剂——使蛋白质分子内及分子间的氢键发生变化而使蛋白质凝聚，与蛋白质结合的药物被释放出来（甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、丙醇、四氢呋喃）。一般离心速度在10000r/min（用具塞塑料离心管）;加入中性盐，如（NH4)2SO4，Na2SO4等，将与蛋白质水合的水置换出来，使蛋白质脱水而沉淀。 加入强酸（10%三氯乙酸、6%高氯酸等） 在低于蛋白质等电点pH时，与蛋白质阳离子形成不溶性盐而沉淀。 加入Zn2+、Cu2+在高于蛋白质等电点pH时，与蛋白质阴离子形成不溶性盐而沉淀。 酶解法 （蛋白水解酶—枯草菌溶素） 使组织酶解，释放出药物，不会发生乳化，对与蛋白结合牢固的药物可显著改善回收率。;缀合物水解 缀合物主要是葡萄糖醛酸苷缀合物、硫酸酯缀合物、谷胱甘肽缀合物等。缀合物极性较大，难被有机溶剂提取，故需先进行水解。 常用水解方法有： 酸水解：如HCl，作用强、快、专属性差 酶水解：常用葡萄糖醛酸苷酶或硫酸酯酶或该两种酶的混合酶。酶水解慢、专属、较温和 溶剂解：较温和;有机破坏 提取纯化 液-液提取 液-固提取 被测组分的浓集 衍生化反应 ;第二节 定量分析方法 ;;容量分析法（滴定） 概念：一定浓度的滴定液由滴定管加到待测药物溶液中，按化学计量反应完全。根据滴定液浓度、体积及化学计量计算被测药物含量。 关键问题：等当点的确定。 滴定点——指示剂显示的滴定终点 （指示剂的变色点） 等当点——反应的化学计量点 （消耗的滴定液的摩尔数＝被测物摩尔数）;特点：操作简便、快速、实验条件易实现，但是灵敏度低，通常用于高含量和中含量药物 滴定方式;含量的计算： 定量关系： aA bB 被测药物 滴定液; 滴定度：1mL某物质的量浓度的滴定液相当于被测药物的重量，中国药典用mg表示。 滴定度的计算：;以I2（0.05mol/l）计，反应摩尔比 1∶1;直接滴定法 含量％＝ ×100％ 实际工作中配制的滴定液浓度与药典中的规定浓度不一致，须引入滴定液浓度校正因子( f ) F＝ 含量％＝ ;若异戊巴比妥钠的取样量为0.2052g依法用F=1.010的硝酸银滴定液(0.1 mol/L)滴定，消耗8.10ml，则异戊巴比妥钠的含量 已知：每1 ml 硝酸银滴定液（0.1 mo1/L）相当于24.83 mg的异戊巴比妥钠;回滴定法 加入滴定液A 与被测药物完全反应，再以滴定液B 回滴剩余的滴定液 A 滴定液A 与滴定液B 的浓度是相当的，根据消耗回滴的滴定液体积进行计算 本法需进行空白试验校正 含量％＝ ×100％;光