菝葜提取物的制备工艺及质量控制分析-preparation process and quality control analysis of rhizoma smilacis chinensis.docxVIP

摘 要 菝葜(又名金刚藤)为百合科植物菝葜(Smilax china L.)的干燥根茎，具有祛 风散湿，解毒散淤等功效。用于筋骨酸痛，小便淋漓，带下量多和疔疮臃肿等 症治疗。 金刚藤胶囊是由国家食品药品监督管理局 1999 年首次批准上市用于治疗慢 性盆腔炎的处方药（国药准字 ，并被中华中医药学会和中华医学会 妇科分会推荐为治疗慢性盆腔炎的首选用药。在长期的临床使用中，发现金刚 藤胶囊在治疗妇科炎症久病患者体虚、疼痛症状方面存在功效较弱的缺陷，经 过湖北省中医院妇科专家姜惠中教授多年的辩证组方和临床观察，确定复方金 刚藤胶囊的处方：金刚藤 90 g、生黄芪 30 g、延胡索 20 g, 日服生药剂量达 140 g，从兼顾临床疗效、增强病人适应性考虑，本课题组按中药新药注册分类 5 类 新药（中药有效部位）研究要求，分别制备菝葜（金刚藤）、黄芪和延胡索的提 取物，混合后添加辅料制成复方金刚藤胶囊剂。 文献报道，甾体皂苷及黄酮类化合物是菝葜治疗妇科炎症的主要有效成 分。本研究采用化学结合药理学的筛选方法：以收膏率、总黄酮和总皂苷的转 移率为考察指标，并辅以苯酚胶浆大鼠盆腔炎模型的药效学试验的指标，优选 出菝葜提取物的制备工艺：取菝葜饮片，回流提取 2 次，第一次加 12 倍量 60% 乙醇回流提取 2 h，趁热滤过，残渣再加 10 倍量 60%回流乙醇提取 1.5 h，趁热 滤过，合并滤液，减压回收乙醇，过滤，制备成浓度为 0.2 g/ml 药液，以 2 BV/h 的吸附流速过 AB-8 型大孔吸附树脂柱（上样量为树脂:药材 = 1:1.8, 径高 比 1:6），用蒸馏水洗涤 5 BV，再用 20%乙醇淋洗 6 BV，最后用 70%乙醇洗脱 4 BV，收集 70%乙醇洗脱液，减压回收乙醇，喷雾干燥（进、出风口温度分别 是 150-170 °C、90-95 °C ，雾化器转速 40 MHz，蠕动泵进料速度 10-20 Hz，旋 风分离压差 0.6 MPa），收集干浸膏粉即得。经三批中试放大验证其制备工艺适  宜大生 产 。菝葜 提 取物的 收 膏率为 3.00%，总黄 酮、总 皂 苷转移 率 分别为 54.72%，57.87%。 根据中国药典和新药研究指南的技术要求，建立了菝葜提取物的系统质量 控制方法：采用紫外-可见分光光度法和 HPLC 法建立了总黄酮、总皂苷、薯蓣 皂苷元和白藜芦醇的含量测定方法。在 8.40-50.40 µg/ml（r = 0.9992）范围内， 总黄酮浓度与吸光度呈良好的线性关系，在 5.20-26.00 µg/ml （r = 0.9990）范 围内，总皂苷浓度与吸光度呈良好的线性关系；在 0.05 - 0.82 mg/ml（r = 0.9994 ）范围内，薯蓣皂苷元浓度与峰面积呈良好的线性关系；在 8.35-83.52 µg/ml（r = 0.9998）范围内，白藜芦醇浓度与峰面积呈良好的线性关系。初步确 定菝葜提取物中总黄酮、总皂苷、薯蓣皂苷元和白藜芦醇的含量不低 于 ： 420.00 mg/g，26.17 mg/g，7.42 mg/g，8.96 mg/g。采用顶空进样气相色谱法建 立菝葜提取物的有机残留检测方法，本品含正己烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙 烯和二乙烯基苯的残留物限度定为正己烷小于 290 ppm，苯小于 2 ppm，甲苯小 于 890 ppm，二甲苯小于 2170 ppm，苯乙烯小于 20 ppm 和二乙烯基苯小于 20 ppm。建立了薄层鉴别方法，阴性对照无干扰，本方法可用于该提取物的定性 鉴别。 本课题优选出了复方金刚藤胶囊的原料药-菝葜提取物的制备工艺，其质量 稳定可控。本研究对保证复方金刚藤胶囊的质量和临床疗效具有实际意义。 关键词： 菝葜提取物；制备工艺；质量控制  Abstract Smilax china L. is the tuber of Smilax china L., which belongs to Liliaceous plant. It has the function of anti-wind, scattering moisture, silt, and detoxification etc. It can also be used for aching muscles, urinate dripping wet. Jingangteng capsule was fist admitted as a prescription drug for Chronic pelvic inflammatory disease(CPID)by SFDA in 1993, it also has been recommended as firs