暴发性肝豆状核变性的临床 病理和基因突变研究-study on clinical pathology and gene mutation of fulminant hepatolenticular degeneration.docx

5、光镜下可见肝细胞大量变性、坏死，胞浆有大量颗粒沉积;电镜下胞浆有许多细胞器碎片和颗粒状高电子密度沉积物，线粒体大小、形态不一;说明铜对肝脏的损害相当严重，与目前国内外文献报道的基本吻合。肾、脑、肺、脾、胰腺、肠道、胆囊、心脏等器官组织均有明显的病理改变，有褐色颗粒沉积，说明铜对全身多器官系统均有严重损害。6、首次在超微病理检测的基础上，采用X一射线能谱仪对FWD肝脏组织进行了金属元素检测分析，直接证明肝细胞沉积的颗粒中含有大量铜。首次直接证实肝脏细胞沉积的颗粒中含有大量铁，与近年国外报道的WD患者存在铁代谢异常结论一致。7、采用21对引物和自行设计的实验条件，成功地扩增了ATP7B基因全部21个外显子及外显子/内含子交界区;琼脂糖凝胶电泳分析可见PCR产物大小与预期的相同，直接测序结果与基因库参照序列相同，说明引物设计正确，实验条件适当，实验结果可靠。8、与正常ATP7B基因比对分析表明，病例一ATP7B的21个外显子均未发现突变;病例二第13号外显子发现有一错义杂合突变:2975C*T突变(Pro992Leu)。这一突变位于ATP7B的通道/磷酸化区和第6跨膜功能区，该区域是ATP7B功能所必须的，如发生突变，势必影响ATP7B的功能。其父亲也有同样的突变，说明突变来源于父亲。该突变国内尚未见报道，提示我国WD的基因诊断不宜只检测第8、12号外显子等突变热区。该突变是否与暴发性病变有关，有待进一步证实。结论:1、至少部分FWD是在肝硬化基础上出现的严重肝损伤。误诊是WD发展成为FWD的重要原因;治疗不当，特别是使用肝毒性药物是加重肝损伤的重要诱因;感染、出血等多种严重并发症，是死亡的直接原因。为此，要高度重视WD的研究，加强学术交流和专业培训，提高认知性和诊疗水平。2、WD的临床表现复杂，起病形式多样，临床工作中诊断不明的肝病、肾病、溶血等要注意与WD的鉴别。3、尿铜和血清游离铜显著增高是FWD的重要临床特点，对诊断和预后判断有重要意义，降低血清游离铜水平可能是治疗的关键。4、FWD患者肝、肾、脑、肺、脾、胰腺、心脏等器官组织均有明显的病理改变和褐色(铜)颗粒沉积，全身多器官系统损害严重。5、X一射线能谱仪进行金属元素检测分析，不仅直接证明WD肝细胞沉积颗粒中含有大量铜和铁，与近年国外报道的WD患者存在铁代谢异常结论一致，也为WD的诊断提出了一种新的方法。6、病例二第13号外显子发现一错义杂合突变，来源于父亲，国内未见报道。突变位于ATP7B的通道/磷酸化区和第6跨膜功能区，可能对其功能有重要影响，是否与暴发性发病有关有待进一步证实。7、WD基因非常复杂，目前致病突变检出率不高，基因诊断仍有一定局限性，迫切需要建立简便、特异、经济、快速的基因诊断方法，并加强非编码区突变的研究。关键词暴发性肝豆状核变性，临床，病理，ATP7B，基因突变AbstractWilsonDisease(WD)15anautosomalreeessiveinheriteddisorderfeaturedbyeoPPermetaboliedysfunetion.It’5molecularetiologiealfaetor15ATP7Bgenemutation，whiehPreventsitsexPressionProduet，P.tyPecoPPertrans而ttingATPenZymes.ThismalfunctionredueeseoPPerexeretioninthebile，whieheausestoxieitytoliver，brainandotherorgantissueswithexeessiveeoPPeraeeumulation.ExtensiveandheterogeneousincliniealsymPtoms，WDindueesmulti一systemielesionstotheliver，nerve，kidney，corneaandotherorgans.FulminantWilsonDisease(FWD)，ararebutgraveeliniealtyPeofWD，15knownforitsseveritywithextremelyPoorPrognosis.Itsmortality15almost100%withoutlivertransPlant.AsitseliniealmanifestationsaresimilartothoseoffulminanthePatiefailurecausedbyotherfaetors，misdiagnosisofFWD15verycolnmon.UPtonow，nolong一termintegratedstu即ofFWDinvolvingelinieal，Pathologya