白藜芦醇对宫颈癌侵袭转移因子mmpstimps s100a4 cd44的表达调节及其生物学意义-regulation of resveratrol on the expression of mmpstimps s100a4 cd44 and its biological significance in cervical cancer.docx

目录一、摘要1(一)中文摘要1(二)英文摘要7二、正文15／、—1L—j_．(一)刚舌．．15第一部分MMP-9／TIMP-1、MMP-2／TIMP-2、S100A4、CD44s／v6在不同类型宫颈癌中的表达特点23(二)材料和方法25(三)结果28(四)讨论38(五)结论42(六)参考文献43第二部分HPVl6、HPV广谱在不同类型宫颈癌组织的表达特点及与MMP一2／-9、S100A4和CD44v6的相关性49(二)材料和方法．．5O(三)结果．．51(四)讨论．．55(五)结论57(六)参考文献．．58第三部分白藜芦醇对宫颈癌细胞侵袭转移相关因子MMPs／TIMPs、S100A4、万方数据CD44s／v6表达的影响．．60(二)材料和方法62(三)结果73(四)讨论．80(五)结论84(六)参考文献85三、综述90(一)综述90(二)参考文献．．102四、缩略词表117五、致谢．119万方数据大连医科大学博士学位论文白藜芦醇对宫颈癌侵袭转移因子MMPs／TIMPs、S100A4、CD44的表达调节及其生物学意义博士研究生：刘铭指导教师：李宏教授专业名称：病理学与病理生理学摘要研究背景：宫颈癌是世界范围内第三种常见的恶性肿瘤，是导致女性死亡的重要原因之一。人乳头状瘤病毒(HPV)感染是宫颈癌发生的最主要危险因素，尤其是高危型HPV的持续性感染是导致宫颈癌变的重要原因之一。宫颈癌的病理类型以鳞癌和腺癌最为常见。宫颈癌的预后与临床分期、病理类型等因素密切相关：中晚期宫颈癌因有远处转移而预后极差；宫颈腺癌因转移较早，预后相对较差。通常对宫颈癌术后及晚期宫颈患者采用放化疗联合的治疗方案，以控制盆腔复发、减少转移、延长患者的生存期；但由于肿瘤患者对放化疗的敏感性降低、耐药性增强，放化疗药物的毒副作用等原因使其治疗效果并不理想。因此探究宫颈侵袭转移的分子机制，并寻求一种毒副作用较小的适合不同病理类型宫颈癌的特异性治疗方法，对于宫颈癌患者的个体化治疗有着极其重要的临床应用价值。肿瘤的侵袭转移是一系列复杂的多步骤过程，现已知广泛的蛋白水解作用与基底膜的重塑是恶性肿瘤转移潜能的重要标志。侵袭过程中多种基质金属蛋白酶(MMPs)参与了对细胞外基质(ECM)成分的降解。其中可降解Ⅳ型胶原和明胶的MMP．2和MMP．9在多种转移癌中呈现高表达，并与患者的不良预后密切相关。MMPs的活性可受到基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)的控制作用。如TIMP．2可特异性抑制MMP．2，而TIMP．1优先与MMP．9结合。TIMPs与MMPs间内稳态平衡的破坏是恶性肿瘤进展的首要步骤，也是肿瘤进展中极为重要的早期分子事件。S100A4属于S100超家族成员。人S100A4基因的前两个外显子不含编码序列万方数据大连医科大学博士学位论文与转录调控有关，其常见的拼接异构体有ASl、AS2两种。S100A4可参与细胞增殖、凋亡、侵袭及血管生成等多种病理生理过程。研究发现在多种肿瘤组织中S100A4呈现过表达。S100A4在肿瘤进展与转移中起着重要作用，被视为转移相关基因。临床资料亦显示S100A4表达与癌症患者的预后密切关联。故S100A4可作为评价肿瘤转移潜能、预测患者预后的独立生物学指标。CD44是位于细胞表面的跨膜糖蛋白，主要参与细胞间相互作用、细胞粘附和细胞迁移。由于可变剪接该基因可产生许多功能不同的亚型，如CD44s和CD44v。大量研究报道CD44表达的变化与多种癌症的转移潜能有关。其中CD44v6与肿瘤的关系最为密切，其过表达能使肿瘤细胞获得侵袭转移的能力。多项研究表明CD44及其变异体在多种癌症发生发展中的作用具有多面性，提示CD44对肿瘤的影响因肿瘤的不同进展阶段而异，与癌症的组织类型有关。HPV感染是宫颈癌发生的最主要危险因素。高危型HPV(HPVl6、HPVl8)的持续性感染与宫颈的癌前病变和侵袭性宫颈癌的发生最为密切。高危型HPV的E6与E7病毒癌蛋白分别抑制宿主细胞的p53和RB蛋白，它们的失活可诱导细胞的恶性转化。此外最新研究表明，HPVl6的E6／E7可以某种方式促进癌细胞的侵袭潜能，有助于宫颈癌的进展与播散。白藜芦醇是一种广泛存在于葡萄等植物组织中的多酚类化合物。研究发现白藜芦醇能够抑制细胞增殖、诱导凋亡、抑制侵袭转移，这使其成为抗肿瘤的天然武器。作为无毒副作用的新型药物白藜芦醇，具有抗宫颈癌的作用。尤其近年来发现白藜芦醇可抑制MMP．9的表达，降低了癌细胞的迁移与侵袭能力。综上所述，深入探究白藜芦醇对宫颈癌中侵袭转移相关因子的抑制作用及其潜在机制，对于宫颈癌晚期患者的个体化治疗，提高患者生存的质量有着重要的临床意义。目的：在多种肿瘤中已证实MMP．2／-9、S100A4、CD44s／v6及HPVl6的促癌作用，但关于它们在两种类型宫