固本健脑法对老年健忘大鼠海马组织中rage nf-κb信号通路的影响-effect of strengthening brain by consolidating constitution on rage nf - κ b signaling pathway in hippocampus of senile amnesia rats.docxVIP

目录摘要ⅠAbstractⅣ缩略词表Ⅸ前言1第一部分理论探讨41中医对健忘的认识41.1健忘的病名渊源41.2健忘的病位研究51.3健忘的病因病机研究52固本健脑法的理论依据及应用82.1固本健脑法的提出 82.2固本健脑方的处方依据及应用8 第二部分实验研究11实验一老年健忘大鼠模型的建立11 1材料112方法113结果124讨论14实验二固本健脑法对老年健忘大鼠学习记忆功能的影响 151材料152方法153结果164讨论18实验三固本健脑法对老年健忘大鼠海马组织中 AGEs、Aβ1-42 的影响 201材料202方法203结果 224讨论 24实验四固本健脑法对老年健忘大鼠海马组织中 RAGE、NF-κB 的影 响 251材料 252方法 273结果 304讨论 31实验五 固本健脑法对老年健忘大鼠海马组织中 IL-1β、TNF-α的影响 321材料 322方法 323结果 324讨论 33第三部分 讨论 35 1固本健脑法的理论依据及应用 352对老年健忘动物模型的评价 353固本健脑法对老年健忘大鼠学习记忆能力的影响 364固本健脑法对健忘大鼠海马组织中 RAGE/NF-κB 信号通路的影响 375展望 38第四部分 结语 40参考文献 41附录 48致谢 56摘要目的比较固本健脑法、补肾健脑法及补脾健脑法对老年健忘大鼠学习记忆 功能及海马组织中RAGE/ NF-κB信号通路的影响，综合评价三者的疗效差 异，初步揭示固本健脑法改善老年健忘的部分分子机制。方法SPF 级健康雄性 SD 大鼠 110 只适应性喂养 1 周后，用跳台法筛选学 习记忆能力相似者 100 只，随机分为造模组 85 只、正常组 15 只，使用腹 腔注射 NaNO2 及 D-半乳糖（D-Gal）造模，1 次/d，共 40d。造模成功大 鼠共 75 只，将其随机分成固本组、补肾组、补脾组、西药组、模型组，每组 15 只，固本组、补肾组、补脾组、西药组分别灌以固本健脑方、六 味地黄丸、归脾丸水煎液和石杉碱甲混悬液，正常组和模型组则灌以等体 积的 0.9%NaCl 溶液，1 次/d，共 20d。给药结束后，用跳台法及水迷宫法 测试其学习记忆能力。行为学测试完毕后，取大鼠海马组织，检测 AGEs 的含量(免疫组化法)， RAGE、NF-κB p65 的表达（Western Blot），A β1-42、IL-1β、TNF-α 的含量（ELISA）。结果1老年健忘动物模型的建立与空白组比较，造模组大鼠毛发枯黄，唇 爪暗红粗糙，活动迟缓，饮食精神差，呈明显的衰老状态；在跳台法测试 中，造模组动物潜伏期缩短（P0.05）、5min 出错次数增多（P0.05）； 在水迷宫定位航行实验中，模型组潜伏期延长（P0.05）、游泳总路程增 多(P0.05)；在水迷宫空间探索实验中，模型组经过原平台位置次数及在 目 标 象 限 停 留 时 间 减 少 (P0.05) 、 首 次 抵 达 目 标 范 围 的 时 间 变 长 (P0.05)。2固本健脑法对大鼠学习记忆能力的影响与空白组比较，在跳台法 测 试 中 ， 模 型 组 大 鼠 潜 伏 期 变 缩 短 (P0.05) ， 5 min 出 错 次 数 增 多（P0.05），在水迷宫定位航行实验中，模型组潜伏期延长(P0.05)，游I泳总路程增多(P0.05)，在水迷宫空间探索实验中，模型组经过原平台位置的次数及在目标象限停留时间减少(P0.05)，首次抵达目标范围时间变 长（P0.05）；各给药组和空白组比较结果同上，与模型组比较则相反； 补肾组、补脾组、西药组与固本组比较，结果与模型组、空白组二者相比 较一致；补肾组、补脾组、西药组组间比较，差异均无统计学意义（P0.05）。 3固本健脑法对大鼠海马组织中 AGEs、Aβ1-42 的影响与空白组比较， 模型组、补肾组、补脾组、西药组 AGEs、Aβ1-42 的表达上调（P0.05）， 固本组 AGEs 的表达上调，Aβ1-42 则差异无统计学意义。与模型组比较， 各给药组 AGEs、Aβ1-42 的表达均下调（P0.05）；与固本组比较，其余给 药组 AGEs、Aβ1-42 的表达上调（P0.05）；补肾组、补脾组、西药组组间 两两比较，差异皆无统计学意义（P0.05）。4 固本健脑法对大鼠海马组织中 RAGE、NF-κBp65 的影响 与空白组比 较，模型组及各给药组 RAGE、NF-κBp65 的表达上调（P0.05）；与模型 组比较，各给药组 RAGE、NF-κBp65 的表达均下调（P0.05）；与固本组 比较，其余给药组 RAGE、NF-κBp65 的表达上调（P0.