固定化酶的制备及其在海参饲料中的应用分析-preparation of immobilized enzyme and its application in sea cucumber feed.docxVIP

烟 烟 台 大 学 硕 士 学 位 论 文烟台大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明： 所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取 得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写 过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。 本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名： 日期： 年 月 日学位论文使用授权说明本人完全了解烟台大学关于收集、保存、使用学位论文的规定，即： 按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本； 学校有权保存学位论文的印刷本和电子版，并提供目录检索与阅览服务； 学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文； 在非保密的论文范围内，学校可以公布论文的部分或全部内容。（保密论文在解密后遵守此规定）论文作者签名： 导师签名：日期： 年 月 日6868版权声明任何收存和保管本论文各种版本的单位和个人，未经本论文作者同意，不得将本论文转 借他人，亦不得随意复制、抄录、拍照或以任何方式传播。否则，引起有碍作者著作权之问 题，将可能承担法律责任。 PAGE 10 PAGE 101 文献综述1.1 研究的内容与意义1.1.1 课题的提出及研究意义20 世纪 90 年代以来，随着人民生活水平的不断提高，健康饮食、医疗保健越来越受到 人们的关注。海参因其丰富的营养价值及保健作用而备受人们的青睐。因此，海参的市场销 售价格逐年攀升，刺参增养殖业也随之蓬勃发展起来。近年来，特别是在我国北方的辽东半 岛和山东半岛地区，养殖规模和产量逐年增高，集约式工业化养殖规模日益扩大。由于大多 数养殖业主一味的追求经济利益，采取高密度放养，加上管理缺乏理论指导，结果导致养殖 水体中氧含量不足，海参消化能力减弱，大量残饵及海参代谢物沉积在养殖池底。造成水体 中氮、磷等营养物质含量持续增高，致使大量致病菌孳生，导致养殖海参出现多种症状的疾 病。主要表现为胃萎缩、化皮病、摇头病、肿嘴病等。给养殖业主带来了巨大的经济损失。 本科题以此为研究背景，采用酶工程技术手段，即寻求采用固定化酶作为解决方案来提高海 参肠道的消化利用率、减少代谢产物的排出，既达到缓解和改善海参生活环境、又减少病害 发生之目的。1.1.2 研究的内容与目的研究内容：海参食物消化吸收主要是依赖于体内酶的作用。根据海参肠道内所存在的主 要消化酶及其酶学性质，选取海参主要消化场所(后肠)中酶比活力最高的的 α-淀粉酶和前肠 中酶比活力最高的酸性胃蛋白酶为研究对象，通过补加该类酶制剂，达到强化海参食物消化、 增加吸收的目的。本文分别考察了来源于微生物发酵的真菌 α-淀粉酶和动物酸性胃蛋白酶游 离状态下的酶学性质（温度、pH），并对两种内源酶的固定化制备工艺条件做了优化研究。 并在最佳制备工艺条件下，对固定化酶的酶学性质做了基础研究，主要包括最适反应温度、 最适反应 pH、操作稳定性、机械强度、保存方法等。最后，模拟固定化酶用于酶解海参饵 料试验，通过检测海参饲料中淀粉、蛋白质的酶解程度来衡量固定化酶的使用效果。主要考 察了酶解温度、固定化酶的投加量、酶解时间、固定化酶的重复操作次数等。研究目的：通过将消化酶固定化处理后，用于海参饵料添加剂，并对海参饵料预消化处理，将饵料中大分子、不易溶解的营养物质转化为小分子、易溶解的营养物质，即提高了海参肠道的消化利用率，同时，又能减少代谢物的生成。并且还能对沉积在池底的残饵和代谢 物也起不同程度的降解效果。对净化海参养殖水体，缓解和改善海参生活环境、减少病菌的 孳生，具有一定的积极作用。1.2 海参养殖现状1.2.1 海参简介刺参 Apostichopus japonicus（Selenka），又名仿刺参，属于棘皮动物门（Echinodermata）， 海参纲（Holothuroidea），刺参科（Stichopodidae），仿刺参属（Apostichopus）。目前，据 不完全统计，全世界大约有 1100 多种海参，它们主要分布于世界各大洋的潮间带至万米水 深的海域。,其中，绝大多数海参喜欢底栖生活，附着在礁石、泥沙及海藻丛生的地带[1,2]。 海参身体呈圆筒状，成年海参体长大约 10cm～20cm，特大的可达 30cm，体色较暗， 多肉刺。在我国，海参分布较为较广，仅中国南海就有 30 多种，特别在西沙群岛居多， 温带海区以北方的辽东半岛和山东半岛为主。可参见图 1.1。图 1.1 海参Fig. 1.1 holothurians or sea cucumber1.2.2 国内外养殖进展日本在海参增养殖技术方面起步较早，现已拥有成熟的海参规模化育苗技术。但每年培 育出来的参苗主要用于海上放流增殖。在越南，有报道用网袋、网箱、海底网笼等方式进行