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骨关节炎中基质金属蛋白酶及其抑制剂 　　【摘 要】基质金属蛋白酶（MMPs）参与了OA关节组织的病理破坏。这些酶类降解细胞外基质的大分子并调节管理细胞行为的因子。它们也可能参与组织修复，但也因为它们的超表达成为了破坏疾病进程的一部分。许多研究金属蛋白酶作用的早期临床试验均表明基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP）治疗OA的效果欠佳。因此，我们需要更准确地掌握不同细胞中的MMPs在疾病过程中的确切作用。新型TIMP应该增加其特异性，不仅要了解其催化域的结构，还要知道其他催化基序在底物结合中的作用，或通过研制金属蛋白酶组织抑制剂来实现。也可以考虑通过调节基因表达或防止蛋白活化来抑制这些酶类。 　　【关键词】骨关节炎；软骨；MMP和TIMP 　　【中图分类号】R684.3 【文献标识码】B 【文章编号】1004-7484（2014）01-0029-02 　　1 简介 　　骨关节炎（OA） 是一种慢性退行性疾病，是引起关节疼痛和残疾的主要原因[1]。其特征是关节软骨的破坏导致关节功能障碍。这种破坏主要是由于软骨中降解细胞外基质（ECM）大分子的蛋白水解酶活性的升高。长期以来一直在探讨基质金属蛋白酶（MMPs）与疾病发生和潜在治疗靶点之间的确切相关性，并混淆了它们在许多疾病病理方面的广泛作用。 　　软骨基质由两个主要的ECM成分组成：II型胶原纤维和软骨可聚蛋白聚糖类（约各占45%），还有一些其他含量较少的大分子物质[2]。在正常软骨中，软骨细胞会把合成的大量II型胶原、蛋白多糖等物质分泌到ECM中，构成细胞外纤维网架，给细胞提供支持与保护。这些物质同时被软骨细胞分泌的MMPs降解，维持软骨细胞内外动态平衡。关节软骨损伤时，软骨细胞分泌大量的MMPs对ECM进行降解，软骨细胞失去胶原网络结构支持而破坏，导致OA的发生。 　　2 MMPs：破坏的主宰者？ 　　MMPs属于金属蛋白酶含锌超家族成员，来源于关节的固有细胞和浸润细胞，包括胶原酶、明胶酶、基质降解素、基质溶解素、膜型MMPs和其他分泌型MMP。MMPs最初是以降解基质的蛋白水解酶为特性的，但最近的研究表明它们作用于ECM还可以释放生长因子或产生新的配体[3]。MMPs也可以从载体蛋白中释放生长因子，激活蛋白酶抑制剂，并激活或灭活炎性细胞因子和炎性趋化因子[3]。因此它们在骨形态发生、骨重塑、伤口愈合和血管生成中有重要作用。大多数情况下，MMPs还有可能参与组织的正常生物过程，如修复和重塑[4]。在OA中，组织试图修复损伤、控制炎症和感染，但过程可能并不完整。这种落空的修复伴随基质更新和细胞表面以及胞周分子的调节，可能导致MMPs活性的不平衡，因此造成了组织的破坏。与非关节炎软骨相比，OA关节软骨中的MMP-1、MMP-3、MMP-13，MMP-28均升高。关节软骨的周期性压力负荷可增加MMP-3和MMP-13的表达和活化[5]，甚至单一的压力损伤都可增加MMP-3和TIMP-1mRNAs的表达水平[6]。关节的不稳定、老化、氧化刺激也促进软骨基质的分解。对于造成软骨损伤的MMPs来说，内源性TIMP的水平并不过量。TIMPs是组织中的主要抑制剂。Woessner等[7]在1995年的研究中发现在关节炎中软骨的退变本质上是MMPs和TIMP的不平衡造成的。在各种OA动物模型中应用合成型TIMP预防软骨和骨蛋白水解的实验[8]均支持金属蛋白酶破坏骨关节功能的理论。 　　3 TIMP的临床试验 　　一些在动物模型中显示出疗效的TIMP已被用于临床试验，但都未能在OA疾病中显示出明显疗效[8]。在某些病历中，这些抑制剂还出现了不良反应，如肌肉骨骼疼痛和肌腱炎、轻度贫血、肝酶升高等，主要是由于抑制剂缺乏特异性。人类基因组中有50多个与人类金属蛋白酶密切相关的碱性活性中心的类似结构，在一定程度上可以使它们对相同抑制剂敏感。我们对这些酶类的精确功能还了解甚少，但有些动物模型研究正在证明它们在生物学中的重要性，但抑制其活性的结果还不确定。例如，小鼠MMP14基因缺失可引起关节炎样症状。在注射Ⅱ型胶原蛋白和脂质多糖的单克隆抗体后，MMP-2基因敲除小鼠比野生型小鼠的关节炎更严重；在关节失稳的模型中MMP-3基因敲除小鼠比野生型更易发生OA。这些观察结果所强调的概念是，高度特异性抑制剂对避免毒副作用是有必要的。基于这个原因，进一步开发金属蛋白酶抑制剂的另一个先决条件是对靶酶的准确识别。 　　4 研发选择性TIMP的提议 　　MMPs的活性受到三个水平的调节，即基因转录水平、无活性酶前体的蛋白水解作用和特异性抑制因子TIMP。抗TNF抗体和IL-1受体拮抗剂可有效地减少MMPs[9]。由于对金属蛋白酶基因表达的复杂调节机制仍然缺乏充分的认识，所以并未建立起MMPs信号肽或转录水平的有效调控。此外，也有人担