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茜草与茜草炭对大鼠急性血瘀模型影响比较研究
茜草与茜草炭对大鼠急性血瘀模型影响比较研究 摘要: 目的:观察茜草与茜草炭对急性血瘀模型大鼠的影响,揭示两者在功效方面的异同。方法:皮下注射肾上腺素加冰水浸泡复制大鼠急性血瘀模型,以云南白药为阳性对照,连续给药7 d,利用此模型观察茜草与茜草炭高、中、低各3个剂量组对血液流变学、凝血酶活性及血小板系统的影响。结果:茜草能够显著改善不同切变率下血瘀模型大鼠的全血黏度及血浆黏度,在止血方面体现了一定的双向调节,对由ADP诱导的血小板聚集率表现出一定的影响,但弱于茜草炭。茜草炭主要通过影响内、外源性凝血酶以及纤维蛋白原来达到促凝效果,能明显提高血瘀模型大鼠血小板聚集率(P 关键词: 茜草;茜草炭;大鼠急性血瘀模型 [收稿日期] 2013-06-19 [基金项目] 国家中医药管理局中医药行业科研专项(20110700708);2015年版《中国药典》项目;江苏高校优势学科建设工程项目(ysxk-2010) [通信作者] *丁安伟,教授,博士生导师,Tel:(025E-mail:awding105@163.com [作者简介] 单鸣秋,副教授,Tel:(025E-mail:shanmingqiu@163.com 茜草为茜草科植物茜草Rubia cordifolia L.的干燥根及根茎。本品味苦性寒,具有凉血,祛瘀,止血,通经等功效,用于吐血,衄血,崩漏,外伤出血,瘀阻经闭,关节痹痛,跌扑肿痛等[1]。炒炭后寒性降低,性变收涩,止血作用增强,也是组成传统止血中药“十灰散”的主要药味之一。从两者的性味、功效、主治等方面来看,茜草偏于化瘀止血,而茜草炭则长于收涩止血,可以称其为“生行熟止”。但是,由于茜草与茜草炭均具有良好的止血作用,再加上对两者功效异同的认识不清和处方应付不明确,临床上存在很多混用的现象,在一定程度上影响了它们各自疗效的发挥。为了规范茜草、茜草炭在临床上的合理应用,本实验复制了急性大鼠血瘀模型,研究比较了茜草与茜草炭对模型血液流变学、凝血酶活性和血小板系统的不同影响,阐述对凝血不同途径的影响,来进一步说明茜草、茜草炭在活血、止血方面的异同,以期合理地解释茜草“生行熟止”的炮制理论。 1 材料 1.1 动物 SD雌性、雄性大鼠各半,体重(200±20) g,由南通大学实验动物中心提供,合格证号SCXK(苏)2008-0010。 1.2 药品与试剂 茜草购自安徽丰原铜陵中药饮片有限公司,经南京中医药大学吴启南教授鉴定为茜草科植物茜草R. cordifolia的干燥根和根茎。茜草炭为南京中医药大学丁安伟教授将上述茜草饮片按照2010年版《中国药典》(一部)有关规定炒制而成。云南白药(云南白药集团股份有限公司,批号ZI11023);盐酸肾上腺素注射液(上海禾丰制药有限公司,批号;羧甲基纤维素钠(CMC-Na,国药集团化学试剂有限公司,批号;枸橼酸钠(国药集团化学试剂有限公司,批号;乙二胺四乙酸钠(EDTA,国药集团化学试剂有限公司,批号;水合氯醛(天津市科密欧化学试剂有限公司,批;甲醛(国药集团化学试剂有限公司,批。 试剂盒:凝血酶原时间(PT,批号STY20101-56B)、凝血酶时间(TT,批号STG20301-35A)、活化部分凝血活酶时间(APTT,批号ST20201-58)、血浆纤维蛋白原(FIB,批号STY20401-42),均为北京世帝科学仪器公司生产。ADP(北京中勤世帝科学仪器公司,ADP粉剂1瓶,ADP缓冲液10 mL/瓶),ELISA试剂盒:血栓素(TXB2,批号CK-E30421R)和6-酮-前列腺素(6-keto-PGF1α,批号CK-E30144R)均购自南京建成生物科技有限公司。 1.3 仪器 血小板聚集凝血因子分析仪(北京世帝科学仪器公司,LG-PABER);血液流变仪(北京中勤世帝科学仪器有限公司);离心机(上海安亭科学仪器厂)。 1.4 供试品的制备 用0.5%CMC-Na溶液将云南白药粉末、茜草粉末与茜草炭粉末研匀并稀释至实验所需浓度。 2 方法与结果 2.1 大鼠分组及给药方法 取SD大鼠,雌、雄性各半,90只,体重(200±20) g,随机分为9组,每组10只,分为空白对照组、模型对照组、云南白药组(0.36 g?kg-1)、茜草高、中、低剂量组(5,2.5,1.25 g?kg-1)、茜草炭高、中、低剂量组(5,2.5,1.25 g?kg-1)。对照组与模型组灌胃0.5%CMC-Na溶液,其余各组灌胃等体积的相应药物,每日2次,连续7 d。 2.2 血瘀大鼠模型的复制[2
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