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DNA的提取：组织(细胞)、质粒等RNA的提取：组织、细胞等PCR技术： PCR、RT-PCRRFLP: 限制性内切酶Western blot ? E-mail: jianyanxi2007@126.com 密码：jianyanxi 离子交换层析法 顺序 阳离子基团 载体 样品 流动相 4、根据配体特异性的分离法： ——亲和层析 亲和层析的作用机理 载体 配体 载体 5、根据被分离分子的密度 ——离心技术 三、常用的测定方法1、光谱法（1）吸收光谱法①直接测定法▲ 测定核酸含量 dsDNA C（ug/ml）=A260×50×稀释倍数  ssDNA C（ug/ml）=A260×40×稀释倍数  RNA C（ug/ml）=A260×40×稀释倍数  纯度： DNA A260/A280=1.8 RNA A260/A280=2.0 ▲ 测定蛋白质含量 浓度（g/L） =1.45A280-0.74A260 浓度（g/L） =144(A215-A225) ②比色法 （2）荧光法： 含量低、吸收光谱法不能检测 （3）浊度法： 极稀的悬浮液 几种测定蛋白质和核酸含量的方法 试剂 方法 检测限/ug 蛋白质 双缩脲 S 500-5000 A260 S 100-1000 Lowry S 5-100 考马斯亮蓝 S 5-50 试剂 方法 检测限/ug 核酸（DNA） 甲基绿 F 2 A260 S 1 溴乙锭 F 5×10-2 DAPI F 2×10-2 试剂 方法 检测限/ug 核酸（RNA） A260 S 1 地衣酚 S 20 溴乙锭 F 5×10-2 试剂 方法 检测限/ug 糖类 苯酚-硫酸 S 40 蒽酮-硫酸 S 50  2、电化学法 反应过程中释放出质子氢（H+），用pH计或NaOH溶液滴定，计算出其含量或活力。 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，用NaOH滴定酸的含量，求出葡萄糖氧化酶的活力。 3、生物活性检测法 hCG使小鼠子宫加速增殖，故通过检测小鼠子宫的变化，推算hCG的生物活性。 4、免疫分析法 5、生物传感器 四、样品的浓缩常用的浓缩方法：1、减压加温蒸发浓缩 ——降低液面压力使其沸点降低，减压的真空度愈高，其沸点降得愈低，蒸发愈快， 不耐热的生物大分子 2、空气流动蒸发浓缩  ——空气的流动可使液体加速蒸发（1）铺成薄层的溶液（2）装入透析袋内置于冷室，电扇对准吹风。 浓缩速度慢，不适于大量溶液的浓缩 3、冰冻法  ——低温结成冰，盐类及生物大分子不进入冰内而留在液相中。操作：（1）将待浓缩的溶液冷却使之变成固体（2）缓慢融解，因溶剂与溶质融点的差别而达到除去大部分溶剂的目的。 例：蛋白质和酶的盐溶液  ——不含蛋白质和酶的纯冰结晶浮于液面，蛋白质和酶则集中于下层溶液中，移去上层冰块，可得蛋白质和酶的浓缩液。 4、吸收法 ——通过吸收剂直接收除去溶液中溶液分子使之浓缩。吸收剂：聚乙二醇、聚乙稀吡咯酮、蔗糖、凝胶 5、超滤法 ——各种溶质分子通过薄膜时选择性过滤，液体在一定压力下通过膜时，溶剂和小分子透过，大分子受阻保留。 蛋白质、酶的浓缩或脱盐 膜的选择——不同类型和规格的膜，分子量截止值（即大体上能被膜保留分子最小分子量值）等参数均不同，必须根据工作需要来选用。 Diaflo 超滤膜的分子量截留值：膜名称 分子量截留值 孔的平均直径 XM－300 300，000 140XM－200 100，000 55XM－50 50，000 30PM－30 30，000 22UM－20 20，000 18PM－10 10，000 15UM－2 1，000 12UM05 500 10　 1、真空干燥  适用于不耐高温，易于氧化物质的干燥和保存。 2、冷冻干燥 在相同压力下，水蒸汽压力随温度下降而下降，故在