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分析实验考核方案实验目的实验原理实验题目及组员实验步骤仪器与试剂表格设计6号题目：注射液中维生素B12的测定组员：实验目的及实验原理实验目的掌握紫外-可见分光光度计的操作方法学会采用吸光光度法通过标准曲线定量测定实验原理比尔定律：当入射光的波长、液层厚度和溶液的温度固定时，溶液的吸光度与溶液的浓度成正比。维生素B12是一类含钴的卟啉类化合物，维生素B12不是单一的一种化合物，共有七种。通常所说的维生素B12是指其中的氰钴素，为深红色吸湿性结晶，制成注射液的标示含量有每毫升含维生素B12 50、100或500mg等规格。 维生素B12的水溶液在278±1nm、361±1nm与550±1nm三波长处有最大吸收。仪器与试剂1.紫外-可见分光光度计2.B12标准溶液（500μg/ml）3.50ml容量瓶7个4.小烧杯、洗耳球5.吸量管实验步骤B12标准溶液的配制标准溶液50μg/ml储备液由教师提供。吸收曲线的绘制1.将维生素B12标准溶液1cm比色皿中，以蒸馏水为参比溶液，在300-600nm之间自动扫描。2.测定A-?吸收曲线，从吸收曲线上选择测定B12的适宜波长，一般选用最大吸收波长λmax（查资料得知大概在361nm+/-1nm）实验步骤绘制标准曲线1. 在5个50ml的容量瓶中，用10ml吸量管分别吸取1、2ml、3ml、4ml、5ml的B12系列标准溶液，加入蒸馏水稀释至刻度线，摇匀，没有反应不需要静置。2. 在紫外-可见可见分光光度计上，在所选波长下，用1cm的比色皿，同时测定各溶液的吸光度，绘制A-CB12标准曲线，得出标准曲线方程。实验步骤测定注射液中维生素B12的含量1.平行取注射液三份，以磨砂轮在瓶颈部划1～2圈，掰开后将每支注射液定量转移至25ml的比色管中。（因为注射液很难倒入到瓶口很细的容量瓶中）加入蒸馏水稀释至刻度线，摇匀。2.在所选波长下，用1cm的比色皿，测定各溶液的吸光度。根据吸光度找出相应的维生素B12含量。记录相应的维生素B12含量，带入标准曲线方程计算试液中维生素B12的质量浓度（以μg/ml表示）。表格设计表一：吸收曲线的绘制表二：标准曲线的绘制波长λ/nm吸光度AB12质量浓度/(μg/ml)吸光度A表格设计表三：试液含维生素B12量的测定编号 1 2 3吸光度AB12质量浓度/(μg/ml)The end,thank you!