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非酒精性脂肪肝高脂饲养大鼠模型标准化及评价 　　摘要：随着人民生活水平的提高、生活方式的改变，非酒精性肪性肝病（nonalcoholicfattyliverdisease，NAFLD）在我国发病率正呈现逐年增高趋势，但迄今为止非酒精性脂肪肝的发病机制仍不明确。目前非酒精性脂肪肝大鼠模型运用广泛，尤其是最常用的高脂饲养（highfattydiet，HFD）大鼠模型。为了对该模型有更进一步地了解以及更深层次把握其运用。本文主要通过查阅近10年运用此模型造模的文献，从中收集相关造模数据等资料，得出该模型合理、常用的造模方法。 　　关键词：非酒精性脂肪肝；高脂饲养；大鼠模型 　　1 非酒精性脂肪性肝高脂饲养大鼠模型的研究背景 　　非酒精性脂肪性肝是指除外酒精和其他明确的肝损害因素所致的，其发病与遗传-环境-代谢等因素相关，但其发病机理至今尚未明确。中医学认为该病病因与嗜食肥甘厚味，多逸少劳有关，其病位在肝，与脾、肾等脏腑密切相关。而现代医学角度看，脂肪肝的发病机制主要为肝细胞中的甘油三酯、极低密度脂蛋白合成和排出不平衡形成。为了对该病进行进一步研究，研究者们针对该病设计出了多种动物模型[1]。目前，国内外用于科学研究的非酒精性脂肪肝动物模型主要分为两类。而本文主要通过查阅近10年运用此模型造模的文献，从中收集相关造模数据等资料，通过分析探讨，得出该模型合理、常用的造模方法，现综述如下。 　　2 非酒精性脂肪性肝高脂饲养大鼠模型的应用 　　高脂饲养大鼠模型诱发脂肪肝是国内最常用的非酒精性脂肪肝模型。由于大鼠对胆固醇饲料较易耐受，因而不易形成动脉粥样硬化病变，但其对营养成分改变敏感，特别是在氨基酸、胆碱等供应不足时，可出现肝细胞脂肪变性、坏死等营养缺乏表现，因而是实验研究的好对象。樊丽琳，陈东风等用健康成年雄性8w龄Wistar大鼠，高脂饲料为基础饲料88%，猪油10%，胆固醇2%造模，分别于第4、8w取肝组织观察。发现第4w时，大鼠肝组织显示散在肝细胞脂肪变，细胞内见大泡形脂肪滴，但肝小叶形态完整，汇管区界限清楚，无明显炎性细胞浸润。第8w时，大鼠肝细胞脂肪变明显，多为大泡性脂肪变，见部分肝细胞气球样变，肝小叶结构紊乱，同时小叶内见局灶性肝细胞坏死，有明显淋巴细胞浸润[2]。因此，找到该模型的造模主线，在此基础上根据需要再进一步改善，对我们更全面地掌握该模型的运用以及推广于临床研究具有重要意义。 　　3 非酒精性脂肪性肝高脂饲养大鼠模型文献发现 　　经过查阅近10年的文献，收集运用高脂饲养大鼠造模非酒精脂肪肝模型相关资料发现：①非酒精性脂肪肝高脂饲养大鼠模型的造模大鼠的类型有两种：SD大鼠和wistar大鼠。这也是目前大鼠运用于其他实验比较多的大鼠类型；②对于饲料的的选择，对照组的饲料均为基础饲料，虽然不同研究者所用的基础饲料出自不同场地，但其与模型中所用的高脂饲料配料中的基础饲料配料是统一的，所有对于基础对照组中的基础饲料，也是不存在差异的；③对于饲养时间，从文献中发现有饲养3、4、5w甚至12w。这主要取决于模型所要用于的实验所需以及高脂饲料的配方；④观察指标和测定方法，文献中者们观察的主要有：①一般情况观察如毛色、食欲动、粪便、对外界刺激的反应情况等。②病理组织学检查肉眼观察大鼠肝脏大体变化，并作病理切片HE染色，光镜下观察大鼠肝脏脂肪变性情况，其判断标准详见《非酒精性脂肪肝诊断标准》（2002-10中华肝病学会脂肪肝和酒精性肝病学组制定）或做苏丹W染色和电镜检查了解肝细胞内脂滴的存在情况。③血清生化指标。④肝组织甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）含量的测定等等一些列观测方法。其中所有模型观测指标中都存在肝脏病理组织学检查[3]。 　　4 非酒精性脂肪性肝高脂饲养大鼠模型的主线 　　通过资料分析，我们对大鼠高脂饲养模型主线有了较为明确的认识。下面就是得出的大鼠高脂饲养模型造模方法的主线：选取适当周龄体重的SD大鼠或wistar雄性大鼠若干，分为正常组和模型组。给予基础饲料喂养一周后，模型组给予高脂饲料饲养，高脂饲料配方为：胆固醇2%，猪油10%，基础饲料88%；对照组给予基础饲料喂养。喂养8～12w，根据实验所需可与2、4、8、12w对若干大鼠进行处理，进行大鼠肝脏病理组织学检查和血清生化指标观测[4-5]。以及运用相关统计学方法对所得数据进行分析如肝组织匀浆指标以及血清生化结果采用的单因素方差分析。有了标准化的造模方法，就能造出想要的模型。 　　5 结语 　　高脂饲养大鼠模型是目前为国内外最常用的非酒精性脂肪肝动物模型，模型模拟了人类NAFLD的形成过程及病变特征，还能出现胰岛素抵抗、代谢综合征等全身代谢紊乱表现，病变有渐进性发展过程符合肝脏病变多具有渐进性发展的特点，造模停止后病变逆转缓慢便于药物干预研究，且该模型制作方法简便