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骨保护素在骨修复中应用研究进展 　　摘要：骨保护素（osteoprotegerin，OPG）又称护骨素，是一种新发现的由成骨细胞分泌的糖蛋白，属于缺乏跨膜结构域的肿瘤坏死因子受体超家族（TNF receptor）成员，主要通过与核因子κB 受体活化因子配体（receptor activator for nuclear factor-κB ligand，RANKL） 结合竞争性抑制核因子κB 受体活化因子（receptor activator for nuclear factor-κB，RANK）与RANKL 的结合，抑制破骨细胞基因的转录、分化、活化成熟及诱导破骨细胞的凋亡，从而促进骨的形成，抑制骨的吸收，对骨组织损伤的修复有重要作用。本综述就骨保护素在骨修复过程中的应用做一阐述。 　　关键词：骨保护素；骨修复；破骨细胞 　　1 骨保护素的概况 　　Simont SW等[1]于1997年发现一种能调控骨吸收的糖蛋白，属肿瘤坏死因子受体超家族中的一员。在转基因小鼠的体内研究表明：肝脏分泌的护骨素（OPG）与骨硬化和破骨细胞的分化有关。Tan，HL等[2]进行体外研究后发现重组OPG可抑制前体细胞分化为破骨细胞，而且OPG还可以抑制小鼠卵巢切除后的骨丧失。这些研究表明，对OPG的合理利用可以治疗由破骨细胞活性增加引起的骨质疏松等骨修复性疾病。Morinaga等[3]于1998年发现破骨细胞生成抑制因子（ osteoclastogenesis inhibitory factor， OCIF），经cDNA 测序和氨基酸分析表明，OCIF与从不同细胞系中得到的肿瘤坏死因子受体样分子-1（ the receptor of tumo r necrosis factor-1，TNFR-1） 和滤泡树突状细胞受体-1为同一组基因编码的同一蛋白质分子。美国骨矿研究协会（ The American Society for Bone and Mineral Research，ASBMR）于2000年[4]将这种分子统一命名为骨保护素（OPG）。 　　人类OPG 基因为单拷贝基因（含5个外显子），定位于8q23～24，该位点簇集了多个骨相关基因，如与遗传性多发性外生骨疣有关的基因及编码骨形态形成蛋白1的基因。OPG mRNA主要有3种： 最多的是约2.2～3.0kb大小的片段， 另外较少的两种分别为4.2～4.4kb和6.5～6.6kb，由转录后剪接位点不同所致[5]。 　　骨保护素（OPG）/核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）/核因子-κB受体活化因子（RANK）系统是调控骨代谢的重要通路之一。其中RANKL由成骨细胞表达，RANK由破骨细胞表达，二者结合可促进破骨细胞的分化和成熟，OPG属于肿瘤坏死因子受体（TNFR）超家族成员，缺乏穿膜区和细胞质结构域，为可溶性分泌蛋白，故可结合RANKL，以削弱破骨细胞分化成熟能力和功能活性，限制破骨细胞活跃所导致的过度骨吸收[6]。 　　2 骨保护素对骨修复的影响 　　Kadri等[7]报道对半月板切除诱导骨关节炎的（osteoarthritis，OA）小鼠腹腔注射OPG（10mg/kg）、IL-1受体拮抗剂（100mg/kg）及磷酸盐缓冲液，软骨下骨微CT检查显示OPG治疗后软骨下骨骨容积比率（BV/TV）显著增加，骨小梁分离度显著减低，且软骨Mankin评分和含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶（ADAMTS）阳性细胞数显著下降，但用OPG直接刺激软骨外植体后蛋白多糖分泌并未出现变化；结论认为，全身性应用OPG可抑制骨和软骨退变，但对软骨组织无直接作用。 　　2.1骨保护素对外伤性骨修复的影响 Wang XF等[8]研究发现OPG/RANKL 在骨折后4 周显著性增高，提示OPG 及RANKL与骨折愈合过程有极为密切的关系。Giganti MG等[9]证明在骨折修复阶段IL-6显著性增高，TNF-α显著性降低，而OPG/RANKL 呈增高趋势，显示IL-6、TNF-α、OPG、RANKL 在骨折愈合过程中起重要作用。这些研究显示在骨折愈合的前三期，骨折愈合以成骨为主，这可能与OPG 促进成骨、抑制破骨密切相关。在血管内皮生长因子（ vascularendothelial growth factor，VEGF） 、骨形态发生蛋白（ bone morphogenetic protein，BMP） 等多种炎性因子刺激下，刺激OPG 的生成，OPG与RANKL结合后，竞争抑制RANK 与RANKL的结合，抑制前体破骨细胞向破骨细胞分化，导致破骨细胞生成降低，使骨代谢呈成骨的趋势。在骨折愈合的四期，骨折愈合以塑形为主，与骨折愈合前三期相比，OPG的表达水平和OPG/RANKL可能较前有所降低。