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答案 (1)蛋白质的预期功能 (2)载体 大肠杆菌等受体细胞 (3)蛋白质工程 基因工程 (4)根据新的胰岛素中氨基酸的序列,推测出控制其合成的基因中的脱氧核苷酸序列,然后利用DNA合成仪合成出新的胰岛素基因 谢谢观看! 2.基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。 (2)基因表达载体组成 (3)构建过程: 3.将目的基因导入受体细胞 生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法 显微注射技术 感受态细胞法 受体细胞 体细胞 受精卵 原核细胞 转化过程 将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的染色体DNA上→表达 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 4.目的基因的检测与鉴定 考点三 基因工程的应用与蛋白质工程 [关键点击] 1.乳腺生物反应器与工程菌生产药物 (1)含义: ①乳腺生物反应器是指将外源基因在哺乳动物的乳腺中特异表达,利用动物的乳腺组织生产药物蛋白。 ②工程菌是指用基因工程的方法,使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系。 (2)乳腺生物反应器 ①优点:产量高、质量好、成本低、易提取等。 ②操作过程:获取目的基因→构建基因表达载体→显微注射导入哺乳动物受精卵中→形成早期胚胎→将胚胎移植到母体动物子宫内→发育成转基因动物→在雌性个体中目的基因表达,从分泌的乳汁中提取所需蛋白质。 (3)基因工程药品。 ①生产方式:利用基因工程培育“工程菌”来生产药品。a.“工程菌”:用基因工程的方法,使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系,如含有人胰岛素基因的大肠杆菌菌株、含有抗虫基因的土壤农杆菌菌株等。b.用基因工程生产的药品,从化学成分上分析都应该是蛋白质类。 ②成果:生产出细胞因子、抗体、疫苗、激素等。 (4)两者区别: 比较项目 乳腺生物反应器 工程菌 基因结构 动物基因的结构与人类基因的结构基本相同 细菌或酵母菌等生物基因的结构与人类基因的结构有较大差异 基因表达 合成的药物蛋白与天然蛋白质相同 细菌细胞内没有内质网、高尔基体等细胞器,产生的药物蛋白可能没有活性 比较项目 乳腺生物反应器 工程菌 受体细胞 动物的受精卵 微生物细胞 导入目的基因的方式 显微注射法 感受态细胞法 生产条件 不需严格灭菌,温度等外界条件对其影响不大 需严格灭菌,严格控制工程菌所需的温度、pH、营养物质浓度等外界条件 药物提取 从动物乳汁中提取 从微生物细胞中提取 2.基因诊断 ①方法:DNA分子杂交技术(即DNA探针法)。 ②主要过程: 将互补的双链DNA解旋 ↓ 获得单链DNA片段 ↓ 用同位素、荧光分子或化学发光催化剂标记单链DNA片段 ↓ 引入待检测的DNA样品中 ↓ 检测DNA样品 3.基因治疗 (1)方法:基因置换、基因修复、基因增补、基因失活等。 (2)途径:①体外基因治疗:先从病人体内获得某种细胞进行培养,然后在体外完成转移,再筛选成功转移的细胞扩增培养,最后重新输入患者体内,如腺苷酸脱氨酶基因的转移。②体内基因治疗:用基因工程的方法,直接向人体组织细胞中转移基因的方法。 4.蛋白质工程与基因工程 区别与联系 蛋白质工程 基因工程 过程 预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列 获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 实质 定向改造或生产人类所需的蛋白质 定向改造生物的遗传特性,以获得人类所需的生物类型或生物产品 区别与联系 蛋白质工程 基因工程 结果 可生产自然界没有的蛋白质 只能生产自然界已有的蛋白质 联系 ①蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程; ②基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造。 考情·随堂体验 考情一 基因工程的操作工具 1.基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。根据图判断下列操作正确的是( ) A.目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B.目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 C.质粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割 D.质粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割 解析 目的基因若用限制酶Ⅰ切割时,只能在目的基因的一侧切开,而不能将其切下;质粒若用限制酶Ⅱ切割,两种标记基因均将被破坏,所以只能用限制酶Ⅰ切割质粒。 答案 D 2.将ada(腺苷酸脱氨酶基因
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