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试管1 试管2 第一步 加入适量缓冲液 加入等量纤维 素酶溶液(缓冲液配制) 第二步 ________________30 min 第三步 加入________________ 第四步 60℃水浴保温10 min 第五步 加入________________ 第六步 沸水浴中加热2 min,观察实验现象 结果与结论:①若________________,则表明该纤维素酶能耐受80℃高温。 ②若________________,则表明该纤维素酶不能耐受80℃高温。 (2)酵母菌发酵产生的乙醇属于________(填“初级”或“次级”)代谢产物。 [规范解答](1)80℃水浴保温 适量纤维素溶液 斐林试剂或班氏糖定性试剂 ①试管1内呈蓝色,试管2内有砖红色沉淀产生 ②试管1和2内均呈蓝色 (2)次级 [名师讲评](1)根据实验是探究纤维素酶能否耐受80℃高温,所以应先对纤维素酶用80℃高温处理,常用方法为水浴80℃保温,对酶进行高温处理后,然后再加入适量的纤维素酶作用的底物——纤维素,利用纤维素酶能使纤维素水解为还原糖,来验证经高温处理的酶是否还有活性,还原糖可用斐林试剂或班氏糖定性试剂检测。 ①如果纤维素酶能耐受80℃高温,则经80℃高温处理后,依然能使纤维素水解,经斐林试剂检测能出现砖红色沉淀 ②反之,不能出现砖红色沉淀。 (2)乙醇对酵母菌无明显生理功能,并非是酵母菌生长和繁殖所必需的物质,这样的物质为次级代谢产物。 对接高考模拟 1.(2014·山东,35)玉米是重要的粮食作物,经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下: (1)玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时,该水解产物为酵母菌的生长提供________。发酵过程中检测酵母菌数量可采用________法或稀释涂布平板法计数。 (2)玉米胚芽油不易挥发,宜选用________法或________法从玉米胚芽中提取。 (3)玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用,从而降低生产成本。 (4)利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时,需用耐高温的________催化。PCR一般要经历三十次以上的循环,每次循环包括变性、________和________三步。 答案 (1)碳源 显微镜直接计数 (2)压榨 萃取(注:两空可颠倒) (3)固定化酶 (4)(Taq)DNA聚合酶 (低温)复性(或退火) (中温)延伸 解析 (1)培养酵母菌时,玉米秸秆中纤维素的水解产物能为酵母菌的生长提供碳源。检测酵母菌数量可采用显微镜直接计数法或稀释涂布平板法计数。 (2)玉米胚芽油不易挥发,宜选用压榨法或萃取法从玉米胚芽中提取。 (3)利用固定化酶技术可使葡萄糖异构酶重复利用,从而提高酶的利用率,降低生产成本。 (4)利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时,需用耐高温的(Taq)DNA聚合酶催化。PCR一般要经历三十次以上的循环,每次循环包括变性、(低温)复性(或退火)、(中温)延伸三步。 2.(2014·全国新课标Ⅰ,39)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题: (1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将________分解成________。 (2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成________色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________。 (3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表): 注:“+”表示有,“-”表示无。 酵母膏 无机盐 淀粉 纤维素粉 琼脂 CR溶液 水 培养 基甲 + + + + - + + 培养 基乙 + + + - + + + 据表判断,培养基甲________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是____________________;培养基乙________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是__________________________________。 答案 (1)纤维二糖 葡萄糖 (2)红 透明圈 (3)不能 液体培养基不能用于分离单菌落 不能 培养基中没有纤维素,不会形成CR-纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌。 解析 (1)纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物,是含量最丰富的多糖类物质,能被土壤中某些微生物分解利用;分解纤维素的纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即CX酶、C1酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成
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