米诺环素对糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡及bcl-2 bax表达的影响-effect of minocycline on apoptosis and bcl - 2 bax expression in retinal nerve cells of diabetic rats.docxVIP

米诺环素对糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡及bcl-2、bax表达的影响摘要目的：观察早期糖尿病大鼠视网膜组织形态的变化与神经细胞凋亡及bcl-2、bax的表达，探索米诺环素（minocycline，MNC）对糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响，研究米诺环素对糖尿病视网膜神经保护机制，对米诺环素在糖尿病视网膜疾病中抑制神经细胞凋亡提供新的理论依据。方法：选择健康成年雄性SD大鼠60只,随机分成正常对照组、糖尿病对照组和米诺环素治疗组,每组20只。腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病。米诺环素治疗组给予米诺环素腹腔注射（45mg/kg）,共注射10d,模型组和对照组腹腔注射等体积生理盐水,于给药后4周和8周后的3组动物，分别取每组各10只动物处死，取其眼球，制备视网膜石蜡切片,采用末端脱氧核糖核酸介导生物素化脱氧尿嘧啶缺口末端标记（TerminalDeoxynucleotidylTransferaseBiotin-dUTPNickEndLabeling，TUNEL)法进行凋亡细胞原位标记,行视网膜神经细胞凋亡计数,行免疫组化染色,并对染色结果行计算机图像分析，测每组Bcl-2、Bax的表达，对所有数据进行统计学分析。实验结果拟用均数和标准差（x±s）表示，P0.05为差异有统计学意义。同时制备视网膜超微病理切片，在透射电镜下,行超微结构观察。结果：同一观察时间点，Bax在正常组大鼠视网膜神经细胞见弱表达；在糖尿病组神经细胞有强表达,表现为胞质中棕黄色颗粒增加,颜色加重；Bax在米诺环素治疗组的表达较糖尿病组降低(P0.01),表现为颗粒减少、颜色变浅。Bcl-2在正常组大鼠视网膜神经细胞见弱表达,在糖尿病组有较强表达；Bcl-2在米诺环素治疗组的表达较糖尿病组增强(P0.01)；在不同观察时间，糖尿病组与米诺环素组大鼠视网膜神经细胞内Bcl-2表达差异无显著性(P0.05)，Bax表达8周较4周增多，差异有显著性(P0.01)。同一观察时间，与正常对照组比较,糖尿病对照组视网膜凋亡细胞增多(P0.01),在米诺环素组,大鼠视网膜凋亡细胞比糖尿病组减少,差异有统计学意义(P0.05),电镜下正常组:视网膜神经细胞胞膜完整,染色质分布均匀,线粒体及粗面内质网含量丰富,嵴清楚。糖尿病组:神经细胞胞膜皱缩,胞质浓缩,核固缩,染色质边集现象明显,线粒体肿胀,嵴模糊不清或空泡变。米诺环素治疗组:神经细胞无明显改变,胞膜完整,核周间隙正常,内质网排列较整齐,线粒体轻度肿胀,嵴模糊不清,染色质疏松。结论：米诺环素能有效降低有效降低糖尿病大鼠视网膜神经细胞的凋亡，可降低视网膜神经细胞内Bax的表达，有效提高神经细胞内Bcl-2的表达，这是米诺环素抑制糖尿病视网膜神经细胞凋亡的途径之一。关键词：米诺环素；糖尿病；视网膜；bcl-2；bax论文类型：B（应用研究）ITheeffectoftheMinocyclineonexpressionofapoptosisandbcl-2,baxinretinalnervecellsofratwithdiabetes.AbstractObjective:Tostudythehistopathologicalchangesoftheretinaandtomeasuretheexpressionofapoptosisintheretinaofthediabeticrats.ThestudyistopreliminaryinvestigatetheMinocycline’spreventiveeffectonDiabeticretinopathybyobservingtheinterventionroleofMinocyclineonexpressionofbcl-2andbaxinretinalnervecellsofratwithdiabeticretinopathy.TostudytheeffectoftheMinocycline（MNC）onexpressionofBcl-2,baxinretinalnervecellsofratwithdiabeticretinopathy.Methods:The60ratswererandomlydividedintothreegroups(Eachgrouphave20ratsand40eyes):Group1isthenegativecontrol;group2isthediabetesmodelcontrol;group3istheMinocyclinetreatedgroup.DiabeteswasinducedbyintraperitonealinjectionofSTZ(60mg/kg)dissolvedinsodiumcitrate