鞘蕊苏二萜类生物合成机制与茅苍术根 茎、叶基因表达差异研究-study on the biosynthesis mechanism of sphingolipid diterpenoids and the gene expression difference between stem and leaf of atractylodes lancea.docx

湖北中医药大学学位论文原创性声明本人声明：所呈交的学位论文是在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖北中医药大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：年月日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解湖北中医药大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部份内容，可以采用复印、缩印或其他手段保留学位论文；学校可以根据国家或湖北省有关部门的规定送交学位论文。同意《中国优秀博硕士论文全文数据库出版章程》的内容。同意授权中国科学技术信息研究所将本人学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。（保密论文在解密后遵守此规定）论文作者签名：导师签名：年月日目录中文摘要............................................................................................................IAbstract.............................................................................................................V英文缩略词表...................................................................................................X前言.................................................................................................................XI第一部分鞘蕊苏二萜类生物合成机制1第一章鞘蕊苏二萜类化合物相关基因的克隆及特异性分布.................11材料和仪器........................................................................................12实验方法............................................................................................12.1鞘蕊苏总RNA的提取12.2鞘蕊苏基因片段的扩增..........................................................22.3鞘蕊苏二萜类化合物相关基因3’RACE和5’RACE扩增62.4扩增基因CDS序列132.5实时荧光相对定量PCR143结果分析..........................................................................................183.1基因片段的扩增....................................................................183.2切胶回收.................................................................................193.3菌落PCR203.4CfTPS14、CfTPS15基因全长扩增223.5CfTPS14、CfTPS15基因序列分析233.6实时荧光相对定量PCR294讨论..................................................................................................31第二章鞘蕊苏二萜类化合物相关基因的功能研究...................................321材料和仪器......................................................................................322实验方法..........................................................................................332.1原核表达载体的构建和表达分析的实验方法