牡荆子的化学成分分析以及生药学鉴定-chemical composition analysis and pharmacognosy identification of vitex negundo l..docx

论文题目：牡荆子的化学成分研究及生药学鉴定学科专业：植物学学位申请人：李华强指导教师：秦路平王全喜郑承剑摘要牡荆子为马鞭草科（Verbenaceae）牡荆属植物牡荆VitexnegundoL.var.cannabifolia(Sieb.etZucc.)Hand.-Mazz.的干燥成熟果实。牡荆子具有化湿祛痰、止咳平喘、理气止痛的功效，现代药理研究表明其具有缓解支气管平滑肌、抗炎镇痛、抗氧化、调节内分泌等作用。为了更好的开发和利用牡荆子药用资源，本课题对牡荆子的化学成分进行系统分离、鉴定，为进一步阐明牡荆子的药效活性成分奠定基础。此外，由于民间多将牡荆子与其原种黄荆Vitexnegundo的果实黄荆子混用，本课题拟基于生药学五大鉴别方法（基源、性状、显微、理化和分子鉴别）对两者进行生药学比较研究，以期明确两者之间的异同并为两者能否同用提供实验依据。因此，本课题主要开展以下两方面研究工作：一、牡荆子的化学成分研究将牡荆子乙醇提取物与水混悬后依次经不同极性溶剂萃取，分别得到石油醚部位、二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位。结合现代色谱分离手段以及多种波谱和光谱技术，从牡荆子石油醚部位分离、鉴定化合物6个，从二氯甲烷部位分离、鉴定化合物19个，共分离鉴定化合物25个。其中，木脂素类化合物9个，二萜类化合物4个，三萜类化合物1个，甾体类化合物2个，黄酮类化合物6个，酚酸类化合物3个。其中有3个化合物（VCL-8,12,14）为首次从牡荆中分离得到，分别为4β-羟基泡桐素、Abietatriene-3β-ol与无羁萜。二、牡荆子与黄荆子的生药学比较研究I牡荆为黄荆的变种，两者原植物与果实都非常相似，药用过程中容易混淆。本课题基于生药学五大鉴别方法，对牡荆子和黄荆子进行生药学比较研究。植物基源鉴别中，两者主要区别在于叶片锯齿的有无，黄荆多为全缘，而牡荆叶片多具有浅裂锯齿。果实性状鉴别中，两者基本一致，无明显区别特征。果实粉末显微鉴别中，两者主要区别在于石细胞形态，牡荆子石细胞多为卵圆形或椭圆形，次生壁薄，胞腔呈椭圆形且大；黄荆子石细胞多为披针形或楔形，次生壁较厚，胞腔狭长。理化鉴别中，采用液质联用技术（LC-MS）分析牡荆子和黄荆子的化学成分，结合文献检索建立的牡荆属化学成分数据库进行匹配，从黄荆子中推测出115个化合物，牡荆子中推测出79个，其中69个化合物为两者共有成分，可见两者的化学成分非常相似。分子鉴别中，采用新鲜叶片提取DNA，通过ITS2通用引物进行扩增，测定ITS2序列，基于ITS2序列对黄荆和牡荆进行鉴别。结果显示，牡荆和黄荆的ITS2长度均为221bp，两者共有6个差异位点（第26、36、160、163、171和173位），提示两者的ITS2序列可作为鉴别牡荆和黄荆的依据。综上，本课题从牡荆子中共分离鉴定25个化合物，以木脂素类化合物为主要类型成分，其中3个化合物为牡荆中首次报导，进一步丰富了牡荆的化学成分资料；通过牡荆子和黄荆子的生药学比较研究，探索出粉末显微鉴别和ITS2序列分子鉴别为两者的有效鉴别方法，可为牡荆属植物的鉴别提供一定参考；基于LC-MS的牡荆子与黄荆子化学成分比较分析表明两者化学成分相似度较高，提示两者合用存在一定的合理性，但两者今后是否能够合并收载仍需进一步的化学及药理研究提供科学佐证。关键词：牡荆属；牡荆子；黄荆子；化学成分；生药学鉴定IIAbstractThedryandmaturefruitsofVitexnegundoL.var.cannabifolia(Sieb.EtZucc.)Hand.-Mazz.(VC)arecalled―mujingzi‖inChinese,whichhaveeffectsofdispellingphlegmandeliminatingdampness,relievingcoughandasthma,andregulatingqi-flowingandrelievingpain.It’sreportedbymodernpharmacologicalstudiesthatVCpossesstheactivitiesofrelievingbronchialsmoothmuscle,analgesicandanti-inflammatory,antioxidant,andendocrineregulation.InordertobetterdevelopeandutilizeVC,wethusperformsystematicchemicalinvestigationonVCfruitsinordertoprovidesubstantialbasisforthebioactivecomponentselucidation.Inaddition,duetothemi