硼铝互作下酸柚叶片cdna-aflp分析-cdna - aflp analysis of sour pomelo leaves under boron-aluminum interaction.docxVIP

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2018-07-27 发布于上海
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硼铝互作下酸柚叶片cdna-aflp分析-cdna - aflp analysis of sour pomelo leaves under boron-aluminum interaction.docx

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硼铝互作下酸柚叶片cdna-aflp分析-cdna - aflp analysis of sour pomelo leaves under boron-aluminum interaction

SecretDegree：StudentNumber:1120820003ThesisforM.S.DegreeofFujianAgricultureandForestryUniversitycDNA-AFLPanalysisongeneexpressioninresponsetoboron-aluminuminteractionsinleavesofCitrusgrandisDiscipline:AgronomyFirstLevelDiscipline:AgriculturalResourceandEnvironmentSciencesSecondLevelDiscipline:PlantNutritionResearchField:PlantNutritionalandMolecularPhysiologyPostgraduate:WangLiuqingSupervisor:Prof.ChenLisongSubmittedTime:April,2015CollegeofResourcesandEnvironmentalSciencesFujianAgricultureandForestryUniversityFuzhou350002P.R.China独创性声明本人声明，所呈交的学位（毕业）论文，是本人在指导教师的指导下独立完成的研究成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。学位（毕业）论文作者亲笔签名：日期：论文使用授权的说明本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位（毕业）论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。保密，在年后解密可适用本授权书。□不保密，本论文属于不保密。□学位（毕业）论文作者亲笔签名：日期：指导教师亲笔签名：日期：目录摘要IAbstractIIIKeywordsIV第一章引言11铝毒对植物生长发育的影响12铝毒对植物生理生化的影响33硼与植物铝毒害的关系44cDNA-AFLP技术特点及应用55立题意义7第二章材料与方法81试验材料与处理82方法82.1植株干重（DW）和叶片铝、硼浓度的测定82.2叶片气体交换相关参数的测定9RNA的提取，cDNA的合成和cDNA-AFLP分析9荧光定量PCR（qRT-PCR）验证122.5试验设计和统计分析13第三章结果与分析141植物生长和叶片中铝、硼含量142叶片气体交换163叶片cDNA-AFLP差异基因表达164用qRT-PCR验证cDNA-AFLP分析数据26第四章讨论271硼缓解酸柚实生苗铝毒害272信号转导基因273转运基因304碳水化合物和能量代谢基因315核酸代谢基因336氨基酸和蛋白代谢基因347细胞壁和细胞骨架代谢基因368脂质代谢基因379胁迫应答基因3710其他基因38第五章结论40参考文献42在学期间发表的论文59致谢60摘要铝（Al）毒害是许多热带和亚热带酸性土壤作物生长的最主要的限制因素，对农业生产造成了巨大危害。越来越多的研究表明外源施用硼（B）肥可有效地缓解植物铝毒害。但是目前有关硼诱导缓解植物铝毒害的分子机制的报道很少。为了探究植物中硼缓解铝毒的分子机制，本研究以酸柚（Citrusgrandis）实生苗为试验材料，每隔一天施一次营养液，移栽后6周开始进行两个硼水平（2.5或20μMH3BO3）和两个铝Al水平（0或1.2mMAlCl3·6H2O）的硼铝互作处理，处理18周后测定植株生物量和叶片硼铝含量，采集叶片，提取总RNA，逆转录成cDNA，最后进行cDNA-AFLP（cDNA-Amplifiedfragmentlengthpolymorphic）分析。主要结果如下：1、铝毒导致酸柚实生苗生长受抑制。在不加铝处理的植株中，供硼不会显著的影响植株生长；但是在加铝处理的植株中，供20μMB的植株干重（DW）显著高于2.5μMB植株。同时，铝毒还增加了叶片铝和硼的含量。在加铝处理的植株中，供2.5μMB植株叶片的铝含量显著高于20μMB的叶片；不加铝处理的植株，两个硼水平处理叶片的铝含量没有显著差异。无论是加Al还是不加Al处理的叶片中，供20μMB处理的叶片硼含量均高于2.5μMB处理的叶片。2、铝毒降低了酸柚叶片CO2同化作用、气孔导度和蒸腾作用，却增加了叶片胞间CO2浓度。在加铝处理的植株中，20μMB处理的叶片与2.5μMB处理的叶片相比具有更高的CO2同化作用和更低的胞间CO2浓度，然而两个硼水平处理叶片的气孔导度和蒸腾作用没有显著